Гистология в дерматологии забор материала

Обновлено: 02.05.2024

Биопсия при раке кожи. Гистологическое исследование опухоли кожи.

Результаты гистологического исследования при диагностике опухоли кожи более информативны, чем данные цитологического исследования. Это наглядно продемонстрировано при диагностике метатипического рака кожи, занимающего промежуточное положение между базалиомой и плоскоклеточным раком кожи. Поданным Е.С. Снарской (1994), цитологическая картина в 75% случаев метатипического рака была идентична язвенной база-лиоме и лишь в 25% случаев дала возможность предположить метатипический рак. Гистологическое исследование необходимо проводить, даже если диагноз опухоли кожи кажется ясным.

С целью исключения злокачественной опухоли кожи оно должно проводиться при всех кожных узлах, а также целесообразно при опухолях, которые планируется подвергать лучевой терапии, после которой ткань опухоли становится непригодной для гистологического исследования. Гистологическое исследование дает возможность оценить, удалена ли опухоль в пределах здоровой кожи. В некоторых случаях необходимо проведение микроскопически контролируемой операции по серийным гистологическим срезам. Гистологическое исследование необходимо для определения тактики лечения больного и прогноза заболевания. Повторные биопсии с интервалом в несколько недель или месяцев могут быть использованы для мониторинга прогрессиро-вания лимфомы кожи или эффективности ее лечения. Гистологические препараты могут длительно храниться, пересматриваться в любое время, а также использоваться как документ.

Биопсия — метод получения ткани живого организма для морфологического исследования с диагностической целью. Она должна выполняться в условиях операционной или перевязочной с соблюдением всех правил асептики и антисептики. При этом для установления границы новообразования и видимо интактной ткани необходимо хорошее освещение операционного поля. Биопсия выполняется острым инструментом, рассекающим, а не разминающим кожу.

В дерматоонкологии используются эксцизионная биопсия, при которой иссекается вся опухоль, и инцизионная биопсия, при которой иссекается только часть новообразования (в центре, а не с периферии опухоли и с захватом интактной ткани). Материал для гистологического исследования также может быть получен путем кюретажа с использованием кюретки в форме кольца или хирургической ложки. Пункционная биопсия проводится специальным трубчатым ножом диаметром от 2 до 8 мм (чаще всего диаметром 4 мм). Он представляет собой полый цилиндр с режущим краем, который продвигают в толщу кожи, врашая большим и указательным пальцами. При этом получают столбик ткани, состоящий из эпидермиса, дермы и подкожной жировой клетчатки; основание столбика удаляют ножом. Кожный дефект закрывается швом или проводится гемостаз с помощью давящей повязки либо гемостатической губки. Биопсию путем срезания бритвой, скальпелем или ножницами применяют при узловой базалиоме и керато-мантоме. Разрез следует делать параллельно линиям кожного натяжения.

Разнообразие методов исследования материала (световая, электронная микроскопия, иммунофлюоресцентное окрашивание) делает биопсию кожи одним из самых простых и информативных методов диагностики опухолей кожи.

Для обычного гистологического исследования образец помещается в 10% раствор формалина. Стандартно фиксированные препараты не пригодны для гистохимических, цитохимических, иммуногистохимических и электронномикроскопических исследований.

Для электронной микроскопии используется буфер — глутаральдегид, а перед проведением иммунофлюоресцентного исследования образец опухоли должен быть немедленно заморожен или помещен в специальный транспортный буферный раствор.

Трудности биопсии кожи в детской дерматологии

Роль гистологического исследования при диагностике доброкачественных и злокачественных опухолей кожи подробно рассматривается в статье «Система кожных покровов». В то же время провести четкое разграничение между доброкачественными и злокачественными новообразованиями кожи может оказаться довольно сложно. При этом, исходя из того, что доброкачественная опухоль — это локализованная пролиферация клеток одного и того же типа с нормальной дифференцировкой и сохранением контроля за автономностью их роста, а злокачественная опухоль способна к ме-тастазированию в лимфатические узлы и внутренние органы, дать заключение о функциональных способностях опухолей по морфологической картине их маленького кусочка сложно. Особенные затруднения возникают в тех случаях, когда результаты гистологического исследования не коррелируют с клинической картиной опухоли. В этой связи может возникнуть проблема отличия доброкачественных опухолей от гамартом и рака in situ. Отличие доброкачественной опухоли от гамартомы основывается на том, что в гамартому включен более, чем один тип клеток. Что касается рака in situ, то этот диагноз устанавливается на основании признаков снижения дифференциров-ки и ядерной атипии клеток, локализованных лишь в пределах эпидермиса, т.е. отграниченных от других здоровых тканей.

Широкое распространение получают методы иммуноморфологического анализа биопсийного материала. С помощью антител к различным компонентам наружной мембраны или цитоплазмы клеток уточняются гистогенез опухоли, степень ее дифференцировки, начальные этапы инвазии. Используемыми с этой целью маркерами могут быть как вещества антигенной природы (белки, полипептиды, полисахариды), так и относительно простые соединения или даже химические группировки, не обладающие антигенными свойствами.

Для выявления клеток плоского эпителия протоков эккринных, апокринных и сальных желёз, а также гистогенетически связанных с ними опухолей кожи, используют антитела к антигенам эпителиальной мембраны (ЕМА), состоящим из гликопротеинов с высокой молекулярной массой.

Цитокератины, представляющие собой группу промежуточных волокон различного молекулярного веса, обнаруживаются в ороговевающем и неороговевающем эпителии. Для идентификации, например, кератинов высокого молекулярного веса, экспрессируемых многослойным плоским эпителием, используются панцитокератины САМ 5.2 и АР34. Ряд антител к кератину распознают уникальные эпи-топы придаточных структур кожи. С их помощью также можно определять гистогенез или направление дифференцировки многих опухолей пилосебоцейного комплекса и потовых желез.

Маркером меланоцитов является кислый протеин S100, антитела к нему реагируют с клетками Шванна, Лангерганса и эккринных потовых желез, а также с опухолями и гамартомами, развившимися из этих клеток. Его целесообразно использовать для отличия мела-номы от других веретеноклеточных опухолей и для определения мелких отсевов меланомы, расположенных на расстоянии от первичной опухоли или в глубоких тканях кожи. Для идентификации доброкачественных и злокачественных меланоцитарных опухолей кожи также используют NK1-C3 и НМВ 45.

Для идентификации мягкотканных опухолей, наряду с антителами к цитокератинам также используют антитела к другим основным типам белков промежуточных волокон — виментину, десмину и белку нейрофиламентов. Виментин присутствует во многих клетках кожи (фибробластах, макрофагах, хондроцитах. эндотелиальных и лимфоидных клетках), поэтому применение его маркеров весьма ограничено. Напротив, десмин (полипептид с молекулярной массой 53 000) характерен для большинства миоцитов и поэтому не обнаруживается в саркомах, возникших без участия мышечной ткани. Нейрофиламенты, варьирующие по молекулярной массе от 68 000 до 200 000, идентифицируются в кожных опухолях из клеток Меркеля и карцино-идных опухолях. Менее целесообразно их использование при фиброгистиоцитарных опухолях. Хотя в некоторых истинных гистиоци-тарных опухолях могут идентифицироваться антитела к о-антитрипсину, антихимотрип-сину и лизосомам. Сравнительно недавно открыто поликлональное антитело против фактора ХШа. Предполагается, что это клеточный маркер особой субпопуляции дермальных фиброгистиоцитарных клеток, называемых дермальными дендроцитами. Несмотря на то что фактор ХШа обнаруживается во многих клетках при различных типах мягкотканных опухолей, специфичным он является лишь для определенных опухолей, например для гистиоцитомы, богатой, в отличие от выбухающей дерматофибросаркомы, фактор ХIIIа-положительными клетками.

Опухоли кровеносных и лимфатических сосудов могут быть идентифицированы различными эндотелиальными маркерами. Антитела к антигену, связанному с фактором VIII используются для идентификации нормального и неопластического эндотелия, т.к. они не реагируют с тканью лимфатических капилляров, Для идентификации сосудистого эндотелия также используется Ulex Europaeus агглютинин 1. В нефиксированных замороженных срезах для различия между опухолями лимфатических и кровеносных сосудов используют EN4 и PAL-E. Лимфатические и мелкие кровеносные сосуды положительно окрашиваются на EN4. Напротив, на PAL-E могут положительно окрашиваться венулы, вены, капилляры, артериолы и артерии, а лимфатические сосуды — отрицательно,

С целью идентификации лимфом кожи и отличия их от кожных заболевании (укусов насекомых, лимфоцитомы и т.д.) используют панель лейкоцитарных маркеров; для имму-ногистохимического выявления дифференцировочных антигенов мембран опухолевых клеток используются маркеры цитокиновых рецепторов.

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Метод определения Гистологическое исследование биоптатов кожи (окрашивание гематоксилин-эозином) с морфологическим описанием и оценкой согласно гистологической классификации ВОЗ.

Согласно требованиям п. 17 Правил проведения патолого-анатомических исследований, утв. Приказом Минздрава России от 24.03.2016 № 179н, в целях уточнения диагноза заболевания (состояния) с учетом требований стандартов медицинской помощи и клинических рекомендаций (протоколов лечения) по вопросам оказания медицинской помощи на этапе микроскопии биопсийного (операционного) материала врачом-патологоанатомом дополнительно может быть назначено проведение:

  1. дополнительных методов окраски микропрепаратов (постановки реакции, определения) - гистохимических, иммуногистохимических, электронно-микроскопических, молекулярно-биологических, генетических и иных методов;
  2. дополнительных методов микроскопии - поляризационной, флуоресцентной, трансмиссионной или сканирующей электронной и иных методов.

Применение вышеуказанных методов исследования, назначенных врачом-патологоанатомом при проведении исследования в целях уточнения диагноза заболевания (состояния), подлежит дополнительной оплате по стоимости, указанной в утвержденном прайс-листе медицинского центра ИНВИТРО

Гистологическое исследование биоптатов кожи при наиболее тяжелых и распространенных заболеваниях, трудно поддающихся лечению из-за неясности пато- и гистогенеза многих из них (аллергические заболевания кожи, болезни обменного характера, генетически детерминированные заболевания, неинфекционные эритематозные, эритематозно-сквамозные и папулезные болезни, везикулобуллезные (везикулопустулезные) болезни, сосудистые поражения, болезни соединительной ткани, гранулематозные, инфекционные, вирусные и паразитарные болезни кожи).

В диагностике неонкологических болезней кожи большое значение имеет морфологическое (патогистологическое) исследование. Известно более тысячи неопухолевых заболеваний кожи, многие из которых, сходные по клиническим проявлениям, имеют разную этиологию и морфологическую картину. Биопсийное исследование дает возможность диагностировать заболевание на разных этапах его развития, определить стадию процесса, форму той или иной болезни.

Гистологическое исследование в дерматологии имеет свои методологические границы. В части случаев установить точный диагноз при морфологическом исследовании биоптата невозможно. Лишь немногие дерматозы, кроме опухолей, имеют характерное (специфичное) гистологическое строение. Чаще гистологическая картина позволяет только предполагать той или иной диагноз, а может быть совершенно неспецифичной.

Значение гистопатологического исследования часто заключается в подтверждении клинического диагноза или исключении тех дерматозов, диагностика которых основывалась на клинической картине заболевания.

Наибольшие трудности встречаются при гистологическом исследовании большой группы неинфекционных воспалительных дерматозов. При чешуйчатом и красном плоском лишае, красной волчанке гистологические изменения обычно специфичны, однако гистологический диагноз может быть только предположительным. При розовом лишае и парапсориазе гистологические изменения всегда неспецифичны. В случаях инфекционных заболеваний (глубокие микозы, туберкулез, сифилис) клинический диагноз может быть установлен только после применения более точных (ПЦР, иммунофлуоресценция) дополнительных методов определения возбудителя.

Сочетание клинических и морфологических данных делает клиническую диагностику возможной даже в тех случаях, когда изменения в структурах кожи не являются характерными.

Наиболее информативное гистологическое исследование возможно при получении патологоанатомом детальных клинических данных, включая дифференциальный диагноз и фотографии пораженного очага. Важно корректно провести биопсию пораженного очага. Гистологическое исследование полностью развившегося патологического элемента более информативно, чем исследование свежего или развивающегося элемента. Как правило, не рекомендуется включать нормальную ткань в участок биопсии (У.Ф. Левер, 2014) – многие дерматозы характеризуются гистологическими изменениями нижней части дермы и подкожной жировой ткани. Если на коже имеется несколько типов высыпных элементов, для точного гистологического диагноза целесообразно исследовать все.

Первый этап диагностики любого поражения кожи включает анализ анамнеза, симптомов, возникновения и течения заболевания, его продолжительности, локализации патологических изменений и других факторов экзогенного или эндогенного характера, в том числе эндокринных, обменных, нервных и иммунных нарушений. Большое значение имеют данные о давности заболевания, сезонности и склонности к рецидивам.

Пребывание больных в эндемичных районах позволяет установить диагноз инфекционных дерматозов (лейшманиоза, лепры, тропических трепонематозов и др.); работа с животными позволяет заподозрить глубокую трихофитию, сибирскую язву. Контакт с неблагоприятной профессиональной средой (углеводороды, химические соединения) обусловливает возникновение профессиональных дерматитов, экземы, меланодермий.

Метод определения Гистологическое исследование биоптатов кожи (окрашивание гематоксилин-эозином) с морфологическим описанием и оценкой согласно гистологической классификации ВОЗ.

Согласно требованиям п. 17 Правил проведения патолого-анатомических исследований, утв. Приказом Минздрава России от 24.03.2016 № 179н, в целях уточнения диагноза заболевания (состояния) с учетом требований стандартов медицинской помощи и клинических рекомендаций (протоколов лечения) по вопросам оказания медицинской помощи на этапе микроскопии биопсийного (операционного) материала врачом-патологоанатомом дополнительно может быть назначено проведение:

  1. дополнительных методов окраски микропрепаратов (постановки реакции, определения) - гистохимических, иммуногистохимических, электронно-микроскопических, молекулярно-биологических, генетических и иных методов;
  2. дополнительных методов микроскопии - поляризационной, флуоресцентной, трансмиссионной или сканирующей электронной и иных методов.

Применение вышеуказанных методов исследования, назначенных врачом-патологоанатомом при проведении исследования в целях уточнения диагноза заболевания (состояния), подлежит дополнительной оплате по стоимости, указанной в утвержденном прайс-листе медицинского центра ИНВИТРО

Гистологическое исследование биоптатов кожи при наиболее тяжелых и распространенных заболеваниях, трудно поддающихся лечению из-за неясности пато- и гистогенеза многих из них (аллергические заболевания кожи, болезни обменного характера, генетически детерминированные заболевания, неинфекционные эритематозные, эритематозно-сквамозные и папулезные болезни, везикулобуллезные (везикулопустулезные) болезни, сосудистые поражения, болезни соединительной ткани, гранулематозные, инфекционные, вирусные и паразитарные болезни кожи).

В диагностике неонкологических болезней кожи большое значение имеет морфологическое (патогистологическое) исследование. Известно более тысячи неопухолевых заболеваний кожи, многие из которых, сходные по клиническим проявлениям, имеют разную этиологию и морфологическую картину. Биопсийное исследование дает возможность диагностировать заболевание на разных этапах его развития, определить стадию процесса, форму той или иной болезни.

Гистологическое исследование в дерматологии имеет свои методологические границы. В части случаев установить точный диагноз при морфологическом исследовании биоптата невозможно. Лишь немногие дерматозы, кроме опухолей, имеют характерное (специфичное) гистологическое строение. Чаще гистологическая картина позволяет только предполагать той или иной диагноз, а может быть совершенно неспецифичной.

Значение гистопатологического исследования часто заключается в подтверждении клинического диагноза или исключении тех дерматозов, диагностика которых основывалась на клинической картине заболевания.

Наибольшие трудности встречаются при гистологическом исследовании большой группы неинфекционных воспалительных дерматозов. При чешуйчатом и красном плоском лишае, красной волчанке гистологические изменения обычно специфичны, однако гистологический диагноз может быть только предположительным. При розовом лишае и парапсориазе гистологические изменения всегда неспецифичны. В случаях инфекционных заболеваний (глубокие микозы, туберкулез, сифилис) клинический диагноз может быть установлен только после применения более точных (ПЦР, иммунофлуоресценция) дополнительных методов определения возбудителя.

Сочетание клинических и морфологических данных делает клиническую диагностику возможной даже в тех случаях, когда изменения в структурах кожи не являются характерными.

Наиболее информативное гистологическое исследование возможно при получении патологоанатомом детальных клинических данных, включая дифференциальный диагноз и фотографии пораженного очага. Важно корректно провести биопсию пораженного очага. Гистологическое исследование полностью развившегося патологического элемента более информативно, чем исследование свежего или развивающегося элемента. Как правило, не рекомендуется включать нормальную ткань в участок биопсии (У.Ф. Левер, 2014) – многие дерматозы характеризуются гистологическими изменениями нижней части дермы и подкожной жировой ткани. Если на коже имеется несколько типов высыпных элементов, для точного гистологического диагноза целесообразно исследовать все.

Первый этап диагностики любого поражения кожи включает анализ анамнеза, симптомов, возникновения и течения заболевания, его продолжительности, локализации патологических изменений и других факторов экзогенного или эндогенного характера, в том числе эндокринных, обменных, нервных и иммунных нарушений. Большое значение имеют данные о давности заболевания, сезонности и склонности к рецидивам.

Пребывание больных в эндемичных районах позволяет установить диагноз инфекционных дерматозов (лейшманиоза, лепры, тропических трепонематозов и др.); работа с животными позволяет заподозрить глубокую трихофитию, сибирскую язву. Контакт с неблагоприятной профессиональной средой (углеводороды, химические соединения) обусловливает возникновение профессиональных дерматитов, экземы, меланодермий.

Техника биопсии кожи. Возможности гистологического исследования

Для биопсии важно выбрать подходящее место. В большинстве случаев гистологическое исследование полностью развившегося элемента дает больше, чем исследование свежего или развивающегося элемента. Как правило, не рекомендуется включать норхмальную ткань в участок биопсии: неточное приготовление срезов лаборантом может привести к тому, что в препарате будет видна только нормальная кожа.

Биопсированный участок должен включать подкожную жировую ткань, так как многие дерматозы характеризуются гистологическими изменениями нижней части дермы и подкожной жировой ткани. Если имеются различные типы высыпных элементов, то для точного гистологического диагноза иногда целесообразно исследовать несколько элементов.

На основании собственного опыта я считаю достаточным для гистологического исследования кусочек кожи, полученный при помощи 6-миллиметровой биопсийной пробойной иглы. Для заживления раны бывает достаточно двух швов.

Прежде чем поместить биопсированный кусочек кожи в обычный фиксатор, каковым в большинстве больниц служит раствор Ценкера (Zenker) или раствор Хелли (Helly), следует решить вопрос о применении наиболее целесообразных для данного случая красок. Некоторые из специальных красок могут быть применены лишь в том случае, если биопсированный кусочек предварительно фиксировался в соответствующем фиксаторе.

биопсия кожи

Хотя гистологическое исследование — один из наиболее ценных диагностических методов в дерматологии, оно имеет свои границы. Часто точный диагноз не может быть установлен. Причиной этого является то обстоятельство, что достаточно характерное для установления диагноза гистологическое строение имеют лишь немногие дерматозы (кроме опухолей).

Чаще гистологическая картина заставляет только предполагать тот или иной диагноз; она может быть и совершенно неспецифичной. Даже при опухолях могут возникать диагностические трудности. Например, не всегда удается гистологически отличить спиноцеллюлярный рак кожи от псевдоэпителиоматозной гиперплазии. В случаях инфекционных гранулем — таких, как сифилис, туберкулез и глубокие микозы, — точный диагноз часто не может быть установлен до тех пор, пока не удастся обнаружить возбудителя.

Наибольшие трудности, однако, встречаются при гистологическом исследовании большой группы неинфекционных воспалительных дерматозов. При чешуйчатом лишае, красном плоском лишае и красной волчанке гистологические изменения обычно характерны, но в ряде случаев этих заболеваний гистологический диагноз может быть поставлен лишь предположительно. При других заболеваниях этой группы, при различных формах экземы и дерматитов, гистологический диагноз в лучшем случае может быть лишь предположительным. А при розовом лишае, парапсориазе и др. гистологические изменения всегда неспецифичны.

Тем не менее, часто в тех случаях, когда гистологическая картина не является абсолютно характерной, сочетание клинических и гистологических данных делает диагностику возможной.

Часто значение гистопатологического исследования заключается в подтверждении клинического диагноза или в исключении тех дерматозов, диагностика которых предполагалась на основании клинической картины. Естественно, что патологоанатом может предоставить клиницисту максимальные сведения лишь в том случае, если направление на гистологическое исследование сопровождается детальными клиническими данными, включая дифференциальный диагноз.

биопсия кожи у ребенка

Методика щипковой биопсии кожи у ребенка

Информация на сайте подлежит консультации лечащим врачом и не заменяет очной консультации с ним.
См. подробнее в пользовательском соглашении.

Меня зовут Дмитрий Бейнусов, я – врач-дерматоонколог, занимаюсь лечением опухолей кожи: доброкачественных и злокачественных.

Врач-дерматоонколог Дмитрий Бейнусов

Гистологическое исследование опухолей, т. е. изучение характеристик ткани опухоли под микроскопом имеет большое, а иногда и решающее значение для лечения и прогноза. С 2011 года я направляю все удаленные образования кожи специалистам Национального центра клинической морфологической диагностики (НЦКМД); они уже почти 8 лет помогают мне с точной диагностикой.

Эту статью я написал с целью помочь своим пациентам и коллегам лучше ориентироваться в процессе гистологического исследования и понять, как это важно для лечения образований кожи.

Прочитайте эту статью до конца, и вы увидите, как в современных морфологических лабораториях максимально быстро и качественно выполняют исследования, а также сводят к минимуму вероятность человеческой ошибки.

Что такое гистологическое исследование и зачем его проводят

Согласно клиническим рекомендациям Минздрава РФ (2018), гистологическое (морфологическое) исследование – это стандарт диагностики при исследовании опухолей кожи и в первую очередь при подозрении на меланому или рак. Это обусловлено тем, что в настоящее время нет более точного метода для определения характера удаленного образования кожи.

Ни дерматоскопия, ни простой соскоб или пункция с последующим цитологическим исследованием, ни тем более простой визуальный осмотр подозрительной родинки не могут заменить гистологического исследования.

Мифы о гистологическом исследовании

Если ввести в поисковой строке слова «гистология родинки» или «гистология меланома» и посмотреть содержание первых, создается достаточно пугающее впечатление:

  • здесь перепутали родинки разных людей;
  • в этой лаборатории исследование делают 3 месяца;
  • тут не сообщили пациенту об опасном диагнозе;
  • там ошиблись с диагнозом, что закончилось печально.

К сожалению, после ознакомления с информацией в отечественном интернете создается ощущение, что в нашей стране нередко гистологические исследования образований кожи делают «на коленке» и «неизвестно кто и где».

В статье я покажу, что есть другая реальность. Кроме того, назову ошибки, которые могут возникнуть на различных этапах исследования, и, самое главное, какими способами их исключить.

Важные для пациента моменты на этапах гистологического исследования операционного и биопсийного материала кожи

Наш путь начинается в тот момент, когда удаленная опухоль кожи, например родинка, попадает в лабораторию.

Предположим, что врач сделал все правильно.

  1. Родинку сразу после удаления поместил в герметичный контейнер с формалином.

На фото – контейнер с родинкой для гистологического исследования

  1. Приложил к контейнеру направление на морфологическое исследование, которое поможет патоморфологу поставить точный диагноз.

На фото – пример направления пациента на морфологическое (гистологическое) исследование

Если врач все сделал именно так – смело сдаем контейнер и направление в лабораторию.

Передача родинки на гистологию

Администратор, получивший контейнер с родинкой, регистрирует ее – присваивает уникальный номер и QR-код. Эти данные, фамилию и инициалы пациента пишут на специальной кассете, в которой удаленная родинка пройдет все этапы исследования. Мне удалось заснять процесс изготовления кассет и их маркировки:

Все рабочие места врачей и лаборантов оборудованы сканерами QR-кодов. Они позволяют на любом технологическом этапе определить, кому принадлежит материал, и работать с ним. Таким образом, ошибка «перепутали родинки разных людей» в лаборатории исключена.

В Центре трепетно относятся к личным данным пациентов, поэтому Ф. И. О. на этом и других фото намеренно закрыты.

Кассеты, в которых хранят родинки, во время гистологического исследования

2. «Вырезка» и «фиксация»

Далее родинку внимательно осмотрят, опишут в протоколе и поместят особым образом в специальную пластиковую кассету для дальнейшего процесса. Весь процесс фиксируют на цифровую камеру. Видео понадобится в случаях неправильного расположения части родинки в кассете, когда нужно будет вернуться к этому этапу и переориентировать фрагмент.

Осмотр родинки при проведении гистологического исследования

Из промаркированного контейнера с транспортной средой извлекают родинку (невус):

На фото – родинка на гистологическом исследовании

Далее пигментное образование разделяют на несколько частей таким образом, чтобы для гистологического исследования были доступны все участки образования. Здесь все нужно сделать правильно, чтобы точно определить толщину меланомы по Бреслоу, состояние краев резекции кожи с опухолью – эти параметры имеют решающее значение в оценке адекватности операции и в прогнозе заболевания.

Разрезы родинки для гистологического исследования

На кассете с родинкой пишут фамилию и инициалы пациента, которые были указаны на контейнере, а также QR-код и персональный числовой код.

Кассета для хранения родинки для гистологии

Фрагменты размещают в кассете параллельно плоскости ее дна, как показано на картинке ниже. Если фрагмент положить перпендикулярно плоскости кассеты – это может затруднить оценку краев резекции, т. е. полноты удаления родинки или меланомы.

Размещение фрагментов родинки в кассете при гистологии

На правильном размещении фрагментов в кассете остановимся подробнее. Это очень важный момент, который позволяет избежать неинформативных срезов в будущем.

Ориентация фрагментов родинки при гистологическом исследовании

Чтобы исключить подобные ошибки, в процессе исследования используют автоматизированное оборудование.

После того как фрагмент уложат правильно, кассету плотно закрывают, что исключает утрату кусочков и переориентацию на последующем этапе 18–24-часовой фиксации операционного материала в специальном растворе (формалине).

Размещение фрагментов родинки в кассете

3. Проводка

Этот этап проходит полностью в автоматическом режиме. Лаборант только загружает кассеты в гистопроцессор, выбирает программу и запускает ее.

На фото – оборудование для проведения гистологического анализа

Кассеты помещают в металлический бокс специальной камеры в верхней части аппарата.

Образцы для гистологии ставят в аппарат

Растворы из резервуаров в нижней части аппарата по очереди перекачиваются в камеру с кассетами. Каждая жидкость контактирует с фрагментами родинки (невуса) в течение определенного времени, после чего ее откачивают из камеры и заливают новую.

Схема работы оборудования для проведения гистологии

Кассета с фрагментами родинки проходит сложный процесс обезвоживания и подготовки к следующему этапу. Внешний вид ее остается прежним, но внутри происходят изменения:

Уменьшение размеров родинки в ходе гистологии

После завершения этого этапа фрагменты уменьшаются, именно поэтому размеры родинки на стеклопрепарате при гистологическом исследовании примерно на 10 % меньше, чем ее реальный размер до удаления на коже.

4. Заливка парафином

Чтобы изготовить максимально тонкий срез с родинки, ее нужно надежно зафиксировать внутри плотного материала. Парафин идеально подходит для этого – он становится жидким при 56–58 градусах и быстро застывает уже при комнатной температуре.

На фото – аппарат для фиксации материала для гистологии

На этом этапе, как и на предыдущем, все делает автомат, лаборант лишь загружает кассеты без парафина и достает уже готовые к получению срезов парафиновые блоки.

Автоматический процесс обеспечивает самое важное – неизменное положение фрагментов родинки (невуса) в кассете. Оно остается неизменным с момента, когда патоморфолог разделил родинку на несколько фрагментов и аккуратно уложил их в кассеты (см. раздел «Вырезка»).

Конечный продукт этого этапа – фрагмент родинки (невуса) с сохраненной исходной ориентацией и залитый парафином.

На фото – фрагмент родинки, готовый для гистологии

5. Приготовление срезов

Этот этап выполняет лаборант. Прибор, делающий тканевые срезы толщиной в несколько микронов, называется микротом. Срезы настолько тонкие, что разрушаются, если брать их руками. Поэтому сразу после нарезки их переносят в воду определенной температуры, а из нее – сразу на предметное стекло с персональной наклейкой с QR-кодом, числовым номером и Ф. И. О. пациента.

Конечный продукт этого этапа – НЕокрашенный срез из парафинового блока, расположенный на предметном стекле.

6. Окраска и «заключение» окрашенных срезов

На этом этапе лаборант загружает неокрашенные стекла в специальный аппарат, выбирает программу автоматической окраски и запускает ее. Вероятность любых технологических ошибок при этом сведена к нулю.

Роботизированный аппарат переносит кюретку с окрашиваемыми стеклами поочередно из одного красителя в другой, задерживаясь в одном положении в течение запрограммированного времени. После завершения окраски срезы автоматически покрываются специальной пленкой для защиты от повреждений при исследовании и последующем длительном хранении.

Вот красивый ролик о процессе с сайта производителя оборудования:

А вот небольшой фрагмент работы аппарата в лаборатории, который мне удалось заснять:

После завершения процесса из агрегата извлекают полностью готовые для последнего исследования стеклопрепараты.

Готовые материалы для гистологического исследования

8. Изучение препарата врачом-патоморфологом

Наконец родинка (невус) готова к изучению под микроскопом.

В современной лаборатории, такой как НЦКМД, на этом этапе также используются современные и высокие технологии. Но есть два момента, на которые, на мой взгляд, стоит обратить особое внимание.

Морфометрия

С помощью адаптера для микроскопа и специализированной программы врач-патоморфолог на экране компьютера измеряет параметры удаленной родинки в микрометрах (микронах).

Мне, как дерматоонкологу, это особенно важно для последующих измерений, к примеру, толщины по Бреслоу в случаях меланомы, а также расстояний от края опухоли до края резекции.

На фото – процесс морфометрии

На картинках ниже примеры программного измерения различных участков препарата невуса кожи:

Измерение толщины диспластического невуса

Измерение толщины коагуляционного некроза

Коллегиальное мнение

До недавнего времени я не знал, что все заключения НЦКМД с диагнозом «злокачественная опухоль» выходят с подписью нескольких морфологов. Такой подход мне нравится и лишний раз подтверждает, что я не ошибся с выбором лаборатории.

Удаленные консультации

Благодаря передаче изображений препаратов на компьютер, открываются широкие возможности. На картинке ниже – специальный сканер гистологических препаратов VisionTek:

Сканер гистологических препаратов VisionTek

Сканер гистологических препаратов VisionTek

Он позволяет врачам-патоморфологам:

  1. Сканировать препараты в высоком разрешении, пересылать с помощью IT-технологий в другой город или страну, обсуждая результаты исследований с коллегами в нашей стране и за рубежом.

IT-технологии позволяют делиться опытом с коллегами по всему миру

  1. Проводить презентации, клинические разборы и обучение, в том числе и телеконференции.

Демонстрация отсканированного изображения во время публичной презентации

  1. Сохранять большое число изображений препаратов, которые не требуют физического места для хранения

Использование сканера в гистологии позволяет хранить образцы в электронном виде

9. Выдача заключения пациенту

Времена, когда гистологическое заключение выдавали в определенное время и ехать за ним нужно было через весь город, давно прошли. Сейчас результаты исследований из патоморфологической лаборатории отправляют по электронной почте сразу по мере готовности. Национальный центр клинической морфологической диагностики использует эту форму связи с медицинскими учреждениями и пациентами более 4 лет.

В заключении обязательно будут отмечены важные моменты:

Заключение о гистологическом исследовании

  • Название учреждения.
  • Номер исследования.
  • Патоморфологический диагноз.
  • Дата исследования.
  • Фамилия врача, выполнившего исследование.

Заключение

Теперь вы в деталях знаете, какой путь проходит удаленное образование кожи в современной патоморфологической лаборатории.

Коротко перечислю главные преимущества Центра, благодаря которым я сотрудничаю с этой лабораторией:

  • Высокий уровень организации, автоматизации процессов регистрации и пробоподготовки операционного и биопсийного материала и адекватная подготовка лаборантов сводят вероятность ошибок к минимуму.
  • Высокая квалификация врачей, возможность коллегиального мнения, в т. ч. с привлечением ведущих специалистов других учреждений, что является залогом точной диагностики.
  • От момента регистрации контейнера с родинкой до отправки заключения на еmail проходит менее 48 часов, а не 7–10 дней как во многих других лабораториях.

Я, как дерматоонколог, уверен, что, отправив удаленное образование кожи в НЦКМД, гарантированно получу достоверный диагноз.

P.S. От всего сердца хочу поблагодарить сотрудников Национального центра клинической морфологической диагностики, без помощи которых я бы не написал эту статью.

Читайте также: