Забор материала на вирусологическое исследование

Обновлено: 25.04.2024

Е.Б. Лукоянычева–заведующая иммунологической лабораторией ГУЗ КОКБ.

Правила забора биологического материала для иммунологических исследований: Методические рекомендации / Авт.-составитель О.М.Луппова.- Кемерово: ГУЗ КОКБ ,2008.-25 стр.

Введение 4
Раздел 1. Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов
Раздел 2.Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования
Раздел 3.Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)
Раздел 4.
Транспортировка образцов крови
Раздел 5.
Требование к маркировке пробирок
Раздел 6
Образец оформления пробирок и заполнения сопроводительных документов
Приложение № 1
Забор крови на иммунограмму
Приложение №2.
Забор крови на циркулирующий иммунный комплекс
Приложение №.3
Забор крови на криоглобулины
Приложение №.4
Забор крови на группу крови и резус принадлежность
Приложение №5.
Забор крови на реакцию Кумбса
Приложение №6
Забор крови на гемоконтактные гепатиты В и С (HBsAg, анти – HCV)
Приложение №7.
Забор крови на развернутый комплекс маркеров гепатитов
Приложение №8.
Забор крови на клещевой энцефалит, боррелиоз
Приложение №9.
Забор крови на антитела к антигенам описторхисов, лямблий, хеликобактеру
Приложение №10.
Забор крови на цитомегаловирус, токсоплазмоз, герпес
Приложение №.11
Забор крови на а/т к тироидной пероксидазе
Приложение №12
Забор крови на ВИЧ 23
Приложение № 4(образец заполнения)
Список литературы

Данное методическое пособие предназначено для медицинских сестер Кемеровской областной клинической больницы.

Методическое пособие поможет правильно произвести забор биологического материала и оформить сопроводительные документы.

Правильно произведенный забор биологического материала и правильно оформленные направления исключат ошибку на преаналитическом этапе исследования.

Формы сопроводительных документов составлены так, чтобы сократить время медицинской сестры, затрачиваемое на оформление направлений.

Необходимо, чтобы образцы крови были правильно взяты и вовремя доставлены в лабораторию. Нарушения, допущенные на преаналитическом этапе, могут повлиять на результат исследования и его дальнейшую интерпретацию.

Раздел 1.
Общие правила забора биологического материала и оформления сопроводительных документов

Перед забором крови пациенту следует сообщить:

1. На какой вид исследования будет проводиться забор крови.

2. Требования необходимые для данного исследования.

Порядок забора венозной крови

1. Исследование проводится утром натощак, последний прием пищи за 12 часов до взятия крови.

2. Исключение приема алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия крови.

3. Утренний прием лекарственных препаратов, лечебно-диагностических процедур (массаж, ЭКГ, физиотерапевческое лечение и др.) проводится после взятия крови.

5. Пациент перед процедурой должен находиться в покое, сидеть или лежать не менее 5 минут.

6. Продолжительность пережатия сосудов жгутом должна составлять не более 1 минуты.

7. Нельзя просить работать пациента кулаком и массировать предплечье по ходу вен.

Раздел 2
Технология забора крови из периферической вены для лабораторного исследования

подготовить на манипуляционном столе стандартный набор для забора крови из периферической вены, проверив целостность упаковок и сроки годности:

1. лоток для использованных материалов;

2. пробирки для крови;

3. упаковка с 2-мя стерильными салфетками (5х5см) или 4-5 шариками;

5. кожный спиртовой антисептик во флаконе с дозатором;

сделать необходимые надписи на пробирках;

оформить сопроводительные документы в лабораторию;

обеспечить удобное освещение;

помочь пациенту найти удобное положение;

разъяснить пациенту суть предстоящей процедуры, создавая атмосферу доверия, предоставляя возможность задать вопросы;

обработать руки спиртовым антисептиком;

вскрыть упаковки со стерильными материалами;

руку больного уложить в положении максимального разгибания, для чего под руку следует положить валик, имеющий влагостойкое покрытие.

наложить жгут на 10 - 15 см выше выбранной зоны, не нарушая ток крови;

выбрать вену для венепункции;

обработать место венепункции кожным антисептиком и дать высохнуть самостоятельно;

Не пальпируйте вену повторно!

надеть на стерильный шприц иглу;

снять с иглы защитный колпачок;

пальцами левой руки фиксировать кожу над веной;

ввести под кожу иглу срезом вверх под углом 30-40 0 ;

установить иглу параллельно вене и быстрым движением проколоть ее стенку;

иглу продвинуть немного вверх по длине вены;

набрать необходимое количество крови в шприц

- запрещается забор крови свободным кровотоком из иглы в пробирку, а также присоединение к игле нового шприца;

- для безопасного забора крови предпочтительно использовать вакуумный шприц-контейнер.

иглу извлечь из вены;

прижать место венепункции стерильной салфеткой на 2-3 минуты;

осторожно, предупреждая разбрызгивание крови, вылить содержимое шприца через иглу в одну или несколько пробирок.

набрать из емкости «Для дезинфекции инструментов» дезинфицирующий раствор через иглу в шприц;

вставить иглу в специальное отверстие контейнера «Для дезинфекции режущего и колющего инструментария» и, повернув ее, отделить от шприца и оставить в нем в растворе дезинфектанта;

Раздел 3
Правила взятия венозной крови с помощью закрытой системы (вакуумного шприца-контейнера)

Закрытые системы взятия венозной крови представляют собой новое поколение вакуумных шприцев - контейнеров с реактивами. Их использование имеет следующие преимущества перед традиционными способами:

полностью исключается контакт медперсонала с кровью на всех этапах взятия крови и ее транспортировки;

особо прочный пластик закрытых систем позволяет осуществить безопасную доставку крови на любые расстояния;

благодаря наличию широкого спектра пробирок с заранее добавленными реагентами для различных видов анализов (ЭДТА для гематологии, цитрат натрия для коагулогии, активатор свертывания для получения сыворотки), значительно облегчается работа медсестер и лаборатории. Международная цветовая маркировка предотвращает их не правильное применение;

уменьшается количество ошибочных анализов, связанных с неправильным взятием проб крови и неверным соотношением реагентов.

закручивающаяся крышка предотвращает "аэрозольный эффект" при открывании;

1. Надеть иглу на контейнер и закрепить легким поворотом по часовой стрелке. Провести пункцию вены.

1. Провести пункцию вены иглой. Благодаря защитной мембране кровь из иглы не вытекает.

2. Медленно оттягивая поршень, наполнить контейнер кровью. После заполнения кровью контейнер вместе с иглой вынуть из вены. Поршень зафиксировать в конечном положении до характерного щелчка. В случае взятия нескольких образцов крови, контейнер отсоединить. Иглу оставить в вене и на нее надеть следующий контейнер.

2. Создать вакуум в контейнере.
Для этого отвести поршень в конечное положение (до характерного щелчка) и отломить его

3. По окончании взятия крови, шток поршня обломить. Вы получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.

3. Насадить контейнер на иглу. Взятие крови осуществляется под действием вакуума. В этом случае вы также получаете транспортный контейнер с кровью и антикоагулянтом или готовую пробирку для сепарации сыворотки.

Транспортировка образцов крови

При транспортировке образца внутри лечебно-диагностического учреждения, пробирки с кровью должны находиться в контейнере, который в случае повреждения пробирки будет предотвращать разлитие крови.

Порядок доставки крови в лаборатории

Штативы с кровью поместить в герметичный контейнер;

наружные части контейнера двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму для вирусных гепатитов);

доставить контейнер в лабораторию;

вынимать образцы крови из контейнера только в перчатках!

после возвращения из лаборатории контейнер вновь двукратно с интервалом в 15 минут протереть дезинфицирующим средством (концентрация по режиму, предусмотренному для гемоконтактных вирусных гепатитов).

Требование к маркировке пробирок.

Маркировку пробирок и заполнение сопроводительных документов следует проводить аккуратно и четко.

Фамилию, имя, отчество пациента писать четко и разборчиво.

В направлении заполнять все графы.

Не допускается, чтобы этикетка на пробирке была размыта, порвана или плохо приклеена.

Важнейшим этапом исследований является получение полноценного клинического материала, в котором должно содержаться большое количество эпителиальных клеток, которые выстилают глубокие отделы нижних носовых ходов и служат местом размножения вирусов.

Правила забора мазка из носа для изоляции вирусов и люминесцентной микроскопии (РИФ).

Забор материала производится в пробирку с транспортной средой, выданную специалистами вирусологической лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области».

Перед взятием материала полость носа больного очищается тампоном, освобождается от слизи, лейкоцитов, слущенных клеток (провести высмаркивание). Больной при взятии материала должен сидеть, откинувшись на спинку стула, с приподнятой кверху головой и дышать ртом. Детей до 7 лет, во избежании травм, необходимо посадить на колени ассистента, который будет удерживать руки и голову ребенка. Приподняв кончик носа левой рукой, в полость носа вводят сухой велюр-тампон (зонд на пластиковом аппликаторе) легким движением по наружной стенке носа. При этом палочку держат правой рукой как писчее перо, тампон вводят на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем велюр-тампон слегка опускают книзу, вводят в нижний ход под нижнюю раковину, делают легкое вращательное движение на пол-оборота и удаляют тампон вдоль наружной стенки носовой полости. Велюр-тампон сразу погружают в пробирку с 2 мл транспортной средой (палочку обломить так, чтобы флакон закрылся пробкой).

Материал необходимо доставить в вирусологическую лабораторию по адресу: ул. Н.Островского 138, 2 этаж, тел. 50-30-09 с соблюдением «холодовой цепи» в день забора материала.

При необходимости практические навыки и консультацию можно получить у сотрудников вирусологической лаборатории.

Взятие материала от больного для ОТ-ПЦР исследования.

Забор материала проводится аналогично, но в пластиковую пробирку типа Эппендорф с 0,5 мл транспортной среды, выданную специалистами лаборатории эпиднадзора за ООИ (ПЦР отделение) ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Астраханской области» Материал необходимо доставить в ПЦР отделение по адресу: ул. Н.Островского 138, 5 этаж, тел. 33-54-18.

Исследования проводятся с целью мониторинга за циркуляцией вирусов гриппа и ОРВИ на территории Астраханской области по распоряжению или предписанию Управления Роспотребнадзора по Астраханской области.

Образец направления на лабораторное исследование:

на группу респираторных вирусов (грипп, парагрипп, РС-, аденовирусы)

на выделение вируса гриппа/ иммунофлюоресцентное исследование -РИФ / / ПЦР исследование _______________________________________________________________

Возраст (число, месяц, год)

ЛПУ, доставившее материал, отделение

Заболевания сердечно-сосудистой системы

Заболевания легочной системы

Вакцинация против гриппа (дата, серия)

Прием противовирусных препаратов (название, сколько дней)

Прибыл из зарубежной страны (указать страну)

Дата госпитализации в ЛПУ

Дата и время забора материала

Дата и время отправки в лабораторию

Дата и время доставки материала в лабораторию

Ф.И.О. лица проводившего забор клинического материала

(c) Управление Федеральной службы по надзору
в сфере защиты прав потребителей и благополучия
человека по Астраханской области, 2006-2022 г.

1. Брать материал в первые 5 дней заболевания
2. Материал отбирают из полости носа и/или ротоглотки
3. Допускается хранение вышеперечисленного материала до проведения исследования не более 2-х суток при температуре 2 - 8°C.
Забор материала из полости носа (для ПЦР-диагностики)
Перед отбором материала необходимо очистить носовую полость больного от слизи, сухой тампон ввести в полость носа по наружной стенке на глубину 2-3 см, затем слегка опустить вниз, ввести в нижний носовой ход и вращательными движениями тщательно снять эпителиальные клетки.
После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку (типа эппендорф) с 0,5 мл транспортной среды или стерильного физиологического раствора. Конец зонда отламывают о край пробирки или отрезают ножницами (после предварительного их фламбирования) с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают. Пробирки маркируют. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость (полиэтиленовый пакет с замком)

Забор материала из ротоглотки (для ПЦР-диагностики)

Мазки из ротоглотки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки после предварительного полоскания полости рта водой. После забора материала тампон (рабочую часть зонда с ватным тампоном) помещают в стерильную одноразовую пробирку (типа эппендорф) с 0,5 мл транспортной среды или стерильного физиологического раствора. Конец зонда отламывают о край пробирки или отрезают ножницами (после предварительного их фламбирования) с расчетом, чтобы он позволил плотно закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают. Пробирки маркируют. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость (полиэтиленовый пакет с замком)

Техника забора мазков

1.Универсальная транспортировочная среда (или стерильный физ. р-р)
2.Зонд-тампон ПС-вискоза, индивидуальная упаковка, стерильный кат. № ИЛС 300202 (или зонд для взятия биологического материала из уретры и цервикального канала 1 шт/уп кат. №ЗГУ-ЦМ)
3.Микроцентрифужные пробирки градуированные 1,5 мл в 1 уп. 250 шт-(стерильные, Axygen, США) кат. № МСТ-150-С-S(или микроцентрифужные пробирки градуированные 2,0 мл в 1 уп.500шт. (Axygen, США) кат.№ МСТ-200-С)
Можно приобрести микроцентрифужные пробирки с разлитой транспортной средой
4. Пакеты ЗИП 2 шт.

Куда можно обращаться для приобретения расходных материалов ООО "ИнтерЛабСервис" (ИЛС) г. Москва (495) 925 05 54

ООО "ВИТА РОС" г. Ростов-на-Дону 269-93-20(21)
ЗАО " Вектор- Бест-Юг" г.Ростов-на-Дону 295-15-61; 295-13-19
"Медицина Плюс " г. Ростов-на-Дону, 255-13-21, 255-13-24 и др

(c) Управление федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Ростовской области, 2006—2020 г.

Если Вы не нашли необходимую информацию, попробуйте зайти на старую версию сайта

Важным условием успешного выделения вируса является правильный забор патологического материала и транспортировки его в лабораторию.

Отбирать материал следует в наиболее ранние сроки после начала заболевания, соблюдая правила асептики и техники безопасности.
Материал отбирают в стерильную посуду, помещают в транспортную среду для вирусов (ВТС) и плотно закрывают.
При проведении манипуляций медицинские работники и технический персонал должны пользоваться средствами индивидуальной защиты.

Правила отбора патологического материала.

Спинно — мозговая жидкость.

Отбирают 1-2 мл в стерильную пробирку, закрывают резиновой пробкой. Примеси эритроцитов и других клеточных элементов удаляют центрифугированием, вирусы выделяют из надосадочной жидкости.

Собирают среднюю порцию мочи в объеме 10 мл, охлаждают до 4 град С, центрифугируют, осадок помещают в 1 мл транспортной среды для вирусов.

Кровь.

На вирусологическое исследование берут из вены в объеме 5-10 мл, лучше в период лихорадки, добавляют 1 МЕ гепарина на 1 мл крови. На серологическое исследование — кровь из вены в количестве 3-5 мл в сухую пробирку (для получения парных сывороток кровь берут с интервалом 12-14 суток), получают сыворотку путем отстаивания или центрифугирования.

Жидкость из серозных полостей. Берут в объеме 2 мл. Для выделения вируса ее используют сразу или хранят в замороженном виде.

Мазок с конъюнктивы. Забирают сухим ватным тампоном и помещают в транспортную среду для вирусов (ВТС).

Содержимое везикул. Поверхность кожи обрабатывают эфиром, содержимое везикул отсасывают тонкой иглой и переносят в ВТС.

Секционный материал. Отбирают в наиболее ранние сроки после смерти больного. Сначала берут пробы из внеполостных тканей, затем ткани грудной полости, в последнюю очередь — из брюшной полости. Кусочки тканей массой 1-3 г помещают в отдельные стерильные флаконы.

На санитарно-вирусологическое исследование отбирают материал из окружающей среды: почву, воду, молоко и молочные продукты, овощи, фрукты, живые организмы (клещи, моллюски, рыбы и т.д.). Осуществление вирусологического надзора за объектами окружающей среды необходимы для определения интенсивности циркуляции вирусов на определенной территории, их типового состава, оценки эффективности работы по оздоровлению окружающей среды.

Правила взятия патологического материала при гриппе, ОРВИ:

1. Поставьте в штатив 3 пробирки и промаркируют их — пробирку с раствором Хенкса (номер анализа) и две пробирки со стерильными ватными тампонами — «Н» и «З».

2. Усадите пациента удобно.

3. Предложите пациенту освободить нос от слизи.

4. Возьмите тампон с пометкой «Н», в правую руку и введите его в полость носа пациента на глубину 2-3 см и, нажимая с усилием на внешнюю стенку носа, вращательным движением снимите отслоившийся эпителий.

5. Введите этот же тампон в другой носовой ход и возьмите материал таким же способом.

6. Опустите тампон в раствор Хенкса, тщательно его отмойте и отожмите о стенки пробирки, раствор закройте пробкой.

7. Тампон поместите в пробирку с пометкой «Н».

8. Предложите пациенту широко открыть рот.

9. Возьмите в левую руку стерильный шпатель, нажмите им на корень языка. Важно — не вызвать рвотный рефлекс!.

10. В правую руку возьмите второй тампон с пометкой «З» и отберите материал с задней стенки глотки.

11. Опустите тампон в ту же пробирку с раствором Хенкса, отмойте его и отожмите о стенки этой пробирки; тампон опустите в пробирку, на которой указано «З»; закройте её пробкой.

12. Заклейте пробку и верхнюю часть пробирки со средой Хенкса клейкой лентой.

13. Заполните направление, пронумеруйте в соответствии с нумерацией на пробирке и поместите его в пластиковый пакет.

14. Взятый на исследование материал поместите в термоизолирующий контейнер, прикрепите к нему пакет с направлением и транспортируйте в вирусологическую лабораторию

Сбор клинического материала, упаковку и доставку проб осуществляет медицинский работник ЛПО, согласно МР 01/7161-9-34 «Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высокопатогенными штаммами вируса гриппа А (H1N1), у людей». Обязательно наличие сопроводительной информации по форме направления на микробиологические исследования. В направлении на исследование необходимо дополнительно указывать лиц, страдающих сахарным диабетом, ожирением, ВИЧ инфекцией, сердечно-сосудистой и легочной патологией, беременных.

Для забора и доставки материала лечебно-профилактические организации края должны быть обеспечены одноразовыми пластиковыми пробирками и флаконами с завинчивающимися крышками, зондами-тампонами в индивидуальной упаковке или пробирке (тубсере). Не допускается забирать материал в агаризованные транспортные системы среды (Эймса, Кери-Блейр, Стюарта).

Правила сбора клинического (секционного) материала

Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет медицинский работник лечебно-профилактической организации, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность высокопатогенными штаммами вируса гриппа A(H1N1). Забор производят в стерильные одноразовые пластиковые пробирки, контейнеры, стерильными инструментами. Все виды работ проводят с соблюдением противоэпидемического режима, в строгом соответствии с требованиями действующих нормативно-методических документов.

Упаковка, маркирование, условия хранения и транспортирования материала для проведения лабораторной диагностики заболеваний, должны соответствовать требованиям действующих нормативно методических документов.

Для исследования забирают следующие виды клинического материала:

- мазки из полости носа (обязательный материал для ОТ-ПЦР-анализа);

- мазки из ротоглотки (обязательный материал для ОТ-ПЦР-анализа);

- носоглоточное отделяемое (для выделения вируса, ОТ-ПЦР-анализа);

- мокрота (при подозрении на вирусную или вирусно-бактериальную пневмонию).

Целесообразно также включать в исследование аспираты из трахеи, бронхоальвеолярный лаваж и биоптаты легких при возможности их забора. Данные процедуры осуществляет подготовленный медицинский персонал в соответствии с действующими нормативно-методическими документами (МР от 24.05.09 № 01/7161-9-34, МУК 4.2.3115-13).

Перечисленные выше процедуры по забору клинического материала обученный медицинский персонал осуществляет в средствах индивидуальной защиты органов дыхания (респиратор типа ШБ-1 или РБ «Лепесток-200»), защитных очках или щитках для защиты лица, бахилах, двойными резиновыми перчатками. После процедуры отбора материала перчатки обрабатываются растворами дезинфицирующих средств, руки после снятия перчаток обрабатываются антисептиками в соответствии с действующими нормативно-методическими документами.

Выбор времени забора клинического материала очень важен, так как наиболее высокое содержание вируса в дыхательных органах человека регистрируется в течение первых четырех дней после появления признаков заболевания. Образцы должны быть собраны в течение 3 суток после появления клинических признаков.

Для постмортальной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки.

От одного больного должно забираться не менее двух видов клинического материала. Обязательно следует забирать мазки из полости носа, мазки из ротоглотки. Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость.

Упаковка и транспортирование образцов.

Все материалы, доставляемые в лабораторию, должны быть герметично упакованы в соответствии с действующими нормативно-методическими документами:

1) в транспортную емкость (плотно закрывающиеся пластмассовые пробирки или флаконы с завинчивающимися крышками, проверенные на герметичность); плотно закрытый верхний конец транспортной емкости вместе с крышкой герметизируют различными пластификаторами (парафин, лейкопластырь и др., но не скотч), емкость маркируют;

2) в плотный полиэтиленовый пакет подходящего размера с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки; полиэтиленовый пакет следует герметично заклеить или запаять.

В отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают бланк заполненного направления. Пакеты с образцами от одного пациента вместе с направлением упаковывают во второй плотный полиэтиленовый пакет. Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же пакет.

Герметично закрытые полиэтиленовые пакеты помещают в термоизолирующий, плотно закрывающийся контейнер (термос, сумка-холодильник), приспособленный для транспортирования биологических материалов в вертикальном положении, исключающем переворачивание образцов.

В термоконтейнеры и термосы помещают охлаждающие элементы или пакеты со льдом. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения. Сроки и условия транспортирования упакованных проб клинического материала указаны в приложении № 1. На транспортировочные термоконтейнеры должно быть нанесено название лечебной организации краской, устойчивой к действию моющих и дезинфицирующих средств.

Транспортирование проб клинического материала в лаборатории для первичного исследования материала осуществляется нарочно лицом, информированным о правилах доставки материала в соответствии с действующими нормативно-методическими документами. Термоконтейнеры, термосы после доставки материала двукратно обрабатываются дезинфицирующим раствором и возвращаются на следующий день лечебно-профилактической организации.

Читайте также: