Забор материала для исследования на бледную трепонему
Обновлено: 05.05.2024
Бледная трепонема (лат. Treponema pallidum) – это спиралевидная бактерия (спирохета), которая является возбудителем сифилиса. Сифилис – это инфекция, передающаяся преимущественно половым путем, в более редких случаях – бытовым. Возбудитель сифилиса проникает в организм через слизистые оболочки, вызывая в месте своего проникновения специфическое повреждение, именуемое твердым шанкром (первичный сифилис). Далее возбудитель распространяется по лимфатическим путям в организме, поражая кожу, слизистые оболочки, лимфатические узлы, нервная система (вторичный сифилис).
В ответ на проникновение в организм бледной трепонемы иммунная система вырабатывает антитела (иммуноглобулины класса M и G) к антигену трепонемы. Такие иммуноглобулины называются специфическими или трепонемными. Диагностика сифилиса, особенно раннего бессимптомного и позднего латентного (скрытого), основывается на определении уровня специфических (трепонемных) антител в сыворотке крови. Серологическая диагностика сифилиса включает в себя ряд методов, одним из которых является анализ РПГА (реакция пассивной гемагглютинации).
РПГА исследование на бледную трепонему является наиболее высокочувствительным и специфичным методом серологической диагностики наряду с иммуноферментным анализом (ИФА). Принцип анализа РПГА заключается в следующем: при соединении сыворотки крови, содержащей специфические антитела к бледной трепонеме, с эритроцитами, содержащими на своей поверхности антигены трепонемы, наблюдается реакция агглютинации – склеивания эритроцитов между собой. При РПГА анализе на бледную трепонему реакция осуществляется в пробирке или на специальном планшете.
По мнению специалистов, анализ РПГА при диагностике всех форм сифилиса является очень ценным диагностическим методом с высокой чувствительностью и специфичностью, что позволяет использовать его при диагностике ранних и скрытых форм. Существует макро- и микромодификация постановки РПГА анализа. Преимуществом микрометода РПГА анализа является быстрота постановки и учета результатов исследования на бледную трепонему. Результаты микрометода РПГА анализа готовы через 1,5 — 2 часа, макрометода – на следующий день.
Антитела к бледной трепонеме вырабатываются со 2 недели (IgM) – 4 недели (IgG) после инфицирования. Пик их выработки приходится на период вторичного сифилиса. Антитела IgG сохраняются в крови пожизненно, за исключением тех случаев, когда лечение сифилиса началось в самом начале заболевания. По этой причине кровь на РПГА берут только с целью диагностики сифилиса – использовать метод РПГА анализа для дифференциальной диагностики раннего и позднего сифилиса, а также для оценки эффективности лечения нельзя.
Прямые методы диагностики служат для выявления бледной трепонемы (Т. pallidum) или генетического материала этого возбудителя в образцах, взятых из очагов поражения. Прямое выявление возбудителя сифилиса является абсолютным доказательством наличия заболевания. Найденный генетический материал (ДНК/РНК) может свидетельствовать как об активном, так и о ранее леченном сифилисе.
На ранней стадии болезни, возбудитель сифилиса активно размножается в очаге инфицирования, при этом антитела к антигенам бледной трепонемы (Treponema pallidum) начинают появляться только со второй недели после инфицирования. Бледная трепонема располагается в тканевых щелях, между волокнами соединительной ткани, вокруг лимфатических и кровеносных сосудов, в стенках и даже просветах лимфатических капилляров.
При медицинском обследовании, у пациентов с подозрением на сифилис, все высыпания на коже или слизистых оболочках следует считать сифилитическими. Исследованию на бледную трепонему подлежат все эрозивные и язвенные шанкры, мокнущие и эрозивные папулы, широкие кондиломы на коже и слизистых оболочках рта, половых органов и анальной области.
Материалом, который необходим для бактериологического исследования на бледную трепонему, является тканевая жидкость (серум). Если нет возможности исследовать высыпания (например, в случаях раннего сифилиса), то рекомендуется проводить пункцию увеличенного регионарного лимфатического узла с соблюдением всех правил асептики, то есть стерильными инструментами и соблюдая правила, направленные на предотвращение распространения микроорганизмов. Кроме того, образцы могут быть получены путем взятия спинномозговой жидкости (ликвора) или плодной жидкости.
Важным условием для обнаружения бледной трепонемы в пат. материалах является правильное взятие проб из сифилитических элементов. Затем содержимое полученных проб изучают в лаборатории.
Обнаружение бледной трепонемы методом темнопольной микроскопии (ТПМ).
В России в качестве рутинного метода прямой визуализации T. pallidum традиционно используется метод темнопольной микроскопии (ТПМ, dark field microscopy, DFM).
1. Конденсор темного поля
Исследование на бледную трепонему в темном поле зрения проводится с помощью стандартного микроскопа, снабженного конденсором темного поля.
Конденсор представляет собой двояковыпуклую линзу, прикрепляемую снизу предметного столика с таким расчетом, чтобы линза конденсора располагалась под отверстием предметного столика. Конденсор служит для собирания (конденсации) пучка световых лучей, что обеспечивает наибольшее освещение исследуемого предмета.
Неокрашенные живые бледные трепонемы не видны в световой микроскоп при обычном освещении препарата. Необходимые условия создаются путем замены обычного конденсора микроскопа особым конденсором, в котором центральная часть затемнена и проникновение лучей света происходит через узкую щель.
Вследствие получающегося при этом бокового освещения достигается отраженное свечение всех твердых частиц на темном поле (это называется "эффектом Тиндаля"), в том числе бледной трепонемы. Для получения темного поля необходим сильный источник света.
2. Бледная трепонема, характерные особенности при темнопольной микроскопии
Исследование в темном поле микроскопа позволяет изучать бледную трепонему (БТ) в живом виде, а также достоверно отличать её от других трепонем как по морфологическим признакам, так и по характерным особенностям движения.
Чтобы отличать бледную трепонему от морфологически сходных типов сапрофитных трепонем, бледные трепонемы при исследовании должны быть живыми. Темнопольное исследование взятого материала должно быть проведено немедленно, сразу после получения образца, поэтому оборудование должно быть подготовлено заранее.
В затемненном поле зрения бледная трепонема выглядит, как движущаяся тонкая спираль или тонкий нежный пунктир с серебристым оттенком, слабо преломляющие свет. Помимо этих бактерий, в препарате все поле зрения усеяно массой мельчайших светящихся точек, находящихся в хаотичном броуновском движении.
Бледные трепонемы движутся характерным образом: вращаются вокруг своей продольной оси, перемещаются в одном направлении, качаются наподобие маятника или совершают волнообразные, сократительные или сгибательные движения ("шагающая трепонема"). Бледная трепонема движется плавно, что является важной особенностью этого микроогранизма.
T. phagedenis, электронная микроскопия
В полости рта и на половых органах встречаются сапрофитные трепонемы: T . refringens и T. phagedenis (reiteri) в урогенитальном тракте и T. denticola в полости рта.
Непатогенные трепонемы морфологически сходны с T. pallidum. От них бледную трепонему отличает толщина, характер движения и форма завитков.
T.refringens колонизирует наружные половые органы. Эта бактерия движется быстро и неравномерно, отличается большей толщиной, отсутствием сгибательных движений, и более пологими и широкими завитками. T.denticola является представителем нормальной микрофлоры полости рта, ее завитки короче и направлены под более острым углом. В нормальной флоре наружных половых органов человека встречается также T. phagedenis.
Наличие непатогенных трепонем затрудняет исследования материала, взятого из поражений в полости рта или прямой кишке. При дифференциации трепонем может ошибиться даже опытный исследователь, поэтому присутствие этих микроорганизмов делает малодостоверным проведение исследования с данным материалом. Если необходимо провести тестирование материала, полученного из одного из указанных выше мест, то предпочтительнее выполнить DFA или NAAT (лучше отдать предпочтение методу ПИФ или молекулярно-биологическим методам).
Методом темнопольной микроскопии невозможно отличить бледную трепонему от патогенных возбудителей других трепонематозов — T. pallidum carateum (пинта), T. pallidum pertenue (фрамбезия), T. pallidum endemicum (беджель).
3. Применение темнопольной микроскопии для диагностики сифилиса
Микроскопию в темном поле можно применять для диагностики первичных и вторичных поражений кожи при сифилисе в результате заражения половым путем. В редких случаях этот метод можно использовать при третичном сифилисе (в последнем случае — если материал взят из глубины инфильтрата или со дна язвы).
Также с помощью этого метода исследуют поражения при раннем врожденном сифилисе, когда заражение плода бледной трепонемой произошло в утробе матери. Чтобы подтвердить диагноз "врожденный сифилис", для приготовления препарата для микроскопии можно использовать ткань пуповины, органы плода, выжатый сок плаценты, амниотическую (плодную) жидкость, отделяемое слизистой оболочки носа, содержимое пузырей (при ладонно-подошвенной сифилитической пузырчатке), тканевой жидкости (серума) с раздраженных папул.
Метод темнопольной микроскопии, используемый для диагностики сифилиса, отличается простотой, дешевизной, быстротой и достаточно высокой чувствительностью. Однако у него есть известные недостатки – невозможность диагностики скрытых и поздних форм сифилиса и непригодность для контроля излеченности. Даже многократный отрицательный результат микроскопического исследования на бледную трепонему не может исключить сифилис.
Кроме того, для проведения исследования методом ТПМ микроорганизмы T. pallidum должны быть подвижными. В условиях применения пациентами различных антибактериальных препаратов, в том числе для лечения других заболеваний, диагностическая чувствительность ТПМ снижается. В подобных случаях необходимо исследование методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) или проведение серологического обследования на сифилис.
Для повышения информативности лабораторной диагностики разрабатываются более чувствительные и специфичные прямые тесты на основе молекулярно-биологических технологий, например различные модификации метода ПЦР.
Метод прямой иммунофлюоресценции (ПИФ)
При необходимости микроскопия возбудителя в темном поле может быть дополнена прямой реакцией иммунофлюоресценции (ПИФ, direct fluorescent antibody test, DFA).
Прямой метод иммунофлюоресценции (по Кунсу) основан на взаимодействии антител, меченых флюорохромом, с антигеном, который находится на клетке, в клетке или в тканях. В качестве флюорохрома используют флюоресцеинизотиоционат (ФИТЦ).
Метод прямой иммунофлюоресценции предусматривает прямое выявление T. pallidum в образце при обработке материала специфическими моноклональными антителами. При этом на запарафинированные мазки или биопсийный материал накладываются противотрепонемные антитела, меченные флюоресцирующим красителем. Затем, образующиеся комплексы антиген—антитело исследуют под люминесцентным микроскопом.
В результате взаимодействия анти- T.pallidum антител, меченных ФИТЦ, и бледной трепонемы при люминесцентной микроскопии наблюдается специфическое ярко-зеленое свечение: бледная трепонема флюоресцирует ярко-зеленым цветом, сохраняя все морфологические признаки спирохеты.
Забор образцов производится таким же образом, как и для темнопольной микроскопии, при этом сам метод ПИФ является более точным, чувствительным и специфичным, чем ТПМ.
Метод ПИФ имеет преимущества перед темнопольной микроскопией для выявления бледной трепонемы. Флюоресцирующие микроорганизмы проще детектировать, вероятность спутать их с другими видами трепонем снижена. При этом возможна дифференцировка патогенных трепонем от непатогенных при исследовании материала со слизистых полости рта и прямой кишки, фиксация препаратов перед транспортировкой в лабораторию. Для исследования может быть использован материал, полученный при биопсии или аутопсии.
Зарубежные эксперты в настоящее время относят этот метод к числу устаревших из-за трудоемкости по сравнению с ТПМ и по причине того, что исследование не может быть выполнено «у постели больного» из-за необходимости использовать специализированное оборудование.
Кроме того, применение ПИФ ограничено из-за отсутствия промышленного производства и сертификации соответствующих ингредиентов в ряде стран, в частности, ФИТЦ-меченых моноклональных антител к патогенной бледной трепонеме.
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР)
Для диагностики сифилиса применяется прямой метод определения ДНК бледной трепонемы — метод ПЦР; это один из методов амплификации нуклеиновых кислот (МАНК, nucleic acid amplification test, NAAT).
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) позволяет исследовать различные образцы (отделяемое сифилидов, биопсийный материал, биологические жидкости) в свежем, замороженном, фиксированном и парафинированном виде. В качестве объекта исследования методом ПЦР могут быть использованы соскобы шанкров и других высыпаний (папул, широких кондилом и т.д.), спинномозговая, амниотическая жидкость, сыворотка крови.
Метод ПЦР, предложенный в 1983 году сотрудником фирмы «Cetus» (США) Kary Mullis, заключается в амплификации (размножении) в пробирке определенных участков ДНК возбудителя в процессе повторяющихся температурных циклов. Преимуществом методики является то, что при ПЦР-диагностике размножению подвергается не сама бактерия, а только ее ДНК, причем не вся молекула ДНК, а только определенный фрагмент, являющийся маркером данного возбудителя.
ПЦР–тесты для выявления ДНК бледной трепонемы были разработаны в 1991 году одновременно в нескольких лабораториях. Этот метод позволяет выявить и идентифицировать единственную молекулу ДНК бледной трепонемы среди сотен тысяч других молекул, что делает потенциально возможной диагностику нейросифилиса, третичного, врожденного сифилиса при наличии единичных трепонем в исследуемом материале.
Метод ПЦР высокоспецифичен, чувствителен и воспроизводим при правильном проведении и подготовке образцов. Однако, применительно к диагностике сифилиса, методы МАНК пока используется в исследовательских целях.
- PCR в режиме реального времени (PCR-RT). Учет полученных результатов происходит автоматически в режиме реального времени по уровню свечения флюорохромных меток;
- методика PCR-анализа с помощью обратной транскриптазы (PCR-ОТ);
- мультиплексная PCR (PCR-М, М-ПЦР), которая позволяет в биологической пробе одновременно определять наличие возбудителей нескольких заболеваний.
Основными достоинствами метода ПЦР и его модификаций является универсальность (возможность обнаружить любые нуклеиновые кислоты), весьма высокая чувствительность (80 – 94,7 %) и высокая специфичность (до 100 %). Результат получается быстро, для анализа необходима проба малого объема (несколько микролитров). Современные методы ПЦР позволяют одновременно исследовать нескольких возбудителей заболеваний, а также получать документальный ответ в виде фотографий и вносить результаты диагностики на компьютерные информационные носители. К недостаткам метода ПЦР-анализа следует отнести высочайшие требования к оснащению лаборатории, качеству тест–наборов и регламенту исследования.
Метод ПЦР является дополнительным и может быть рекомендован, главным образом, для исследования отделяемого эрозивных и язвенных высыпаний при подозрении на первичный сифилис, особенно при их локализации на слизистой оболочке рта; при применении пациентами местных и системных антибактериальных средств накануне обращения к врачу; при отрицательных результатах серологических тестов в начале первичного периода, когда ошибка метода ТПМ особенно значима.
Развитие высокочувствительного метода ПЦР и разработка его модификаций, оценивается как весьма перспективное. Особую важность этот метод приобретает при диагностике первичного серонегативного сифилиса (при котором серологические исследования дают отрицательный результат), раннего скрытого, врожденного сифилиса и нейросифилиса.
Препятствием к широкому внедрению метода ПЦР для диагностики сифилиса является отсутствие в массовой доступности тест-систем, разрешенных к медицинскому применению. В США применение ПЦР рекомендовано лабораториям, располагающим соответствующими тест-системами (в том числе созданными в самих лабораториях, in house). В России и странах Восточной Европы широкое использование метода лимитируется небольшим количеством наборов реагентов, прошедших валидацию и разрешенных к медицинскому применению на территории соответствующих государст
NASBA
NASBA - Nucleic Acid Sequence-Based Amplification, амплификация, основанная на последовательности нуклеиновых кислот (другие переводы - реакция амплификации на основе нуклеотидной последовательности нуклеиновых кислот, реакция транскрипционной амплификации). Методика NASBA основана на выделении РНК микроорганизма (в отличие от полимеразной цепной реакции, где используется ДНК). Этот метод тестирования считается одним из самых перспективных и многообещающих направлений молекулярной диагностики.
Использование в качестве мишени для NASBA видоспецифических участков рибосомальной РНК обеспечивает методу высокую специфичность. Так как РНК — менее стабильный по сравнению с ДНК тип генетического материала, который быстрее деградирует при разрушении клеток, то на основании результатов выявления РНК можно судить о наличии в образце жизнеспособных микроорганизмов, например, после проведенного лечения. С практической точки зрения важно, что для проведения NASBA в лабораторных условиях используется то же оборудование, что и для проведения ПЦР в реальном времени (PCR-RT). Кроме того, исходный биоматериал после ПЦР может исследоваться методом NASBA. В результате этого существует возможность интегрирования указанного метода в протокол лабораторного обследования, что позволит верифицировать возбудителя
Отдельные исследовательские коллективы уже получают достаточно перспективные результаты при изучении сифилитической инфекции методом NASBA и NASBA-RT, используя в качестве качестве мишени фрагмент гена 16s рРНК бледной трепонемы. Полученные данные позволяют отнести метод NASBA к диагностически перспективным в изучении сифилитической инфекции наряду с имеющимися методами диагностики.
Заражение сифилисом лабораторных животных
Задолго до открытия бледной трепонемы многие ученые стали проводить эксперименты по заражению сифилисом разнообразных животных. В естественных условиях животные сифилисом не болеют, но возможно искусственное заражение некоторых их видов. Первые успешные опыты были проведены на шимпанзе в начале 20-го века. Дальнейшие опыты на обезьянах привели к ряду блестящих научных открытий, но ввиду трудностей содержания и дороговизны обезьян, основными лабораторными животными стали кролики. Опыты с другими животными (холоднокровными, птицами, различными млекопитающими) давали отрицательный или недостаточный для практического применения результат. Некоторое значение имели только данные, полученные на морских свинках и мышах.
Заражение сифилисом кроликов является старейшим методом прямого выявления бледной трепонемы, т.к. кролик является наиболее чувствительным и удобным лабораторным животным для привития сифилиса. Заражение кроликов производят инокуляцией (введением микроорганизмов в ткани, от латинского inoculatio - "прививка") инфекционного материала в яичко. Чувствительность кроликов к инфекции Treponema pallidum практически 100%, если во взятом для прививки материале содержится достаточное количество бледных трепонем.
В качестве метода прямой детекции бледной трепонемы заражение сифилисом лабораторных животных уже давно не применяется для клинической лабораторной диагностики сифилиса. Работа с кроликами требует больших затрат на содержание хорошо оборудованного вивария. Это дорого, трудоемко и результат достигается только через достаточно продолжительное время. В настоящее время данный метод используется только в крупных исследовательских центрах в качестве «золотого стандарта» для оценки чувствительности других тестов.
Заболевание распространяется не только половым путем, но и при использовании зубной щетки, кухонной посуды, полотенца и других бытовых предметов вместе с больным человеком. Иногда болезнь может протекать бессимптомно (пассивный вид), при этом остается риск заражения окружающих. Сдать анализ на сифилис можно в районной поликлинике и частном врачебном кабинете анонимно. Как называется анализ и где его можно сдать.
Материал для исследования
Наиболее часто для анализа на сифилис используется кровь пациента. Иногда в крови содержатся антитела, вызывающие ложноположительную реакцию.
В таких случаях возможный диагноз может быть подтвержден исследованиями другого биологического материала:
- Распространяются по организму и затрагивают спинной мозг. Специальный анализ крови на сифилис Реакция по Вассерману, может подтвердить наличие болезни
- Жидкость, взятая из язвы (твердого шанкра). Исследование вещества имеет высокую достоверность и может быть назначено по клиническим показаниям
- Лимфоузлы в паховой области при развитии болезни воспаляются и увеличиваются. Обследование воспаленных участков может помочь диагностике
- Венозная или артериальная кровь. Кровь на сифилис должна сдаваться натощак из вены или пальца в зависимости от типа анализа
Чтобы узнать, где сдать все анализы на сифилис, нужно обратиться к врачу при первых признаках заболевания. Лабораторные исследования проводятся во многих частных и государственных лабораториях. Сдачу крови на сифилис можно провести в медицинском учреждении или вызвать лаборанта на дом. Должный вид теста определяет врач. Лаборатория проведет тест на сифилис и исследование покажет наличие и отсутствие болезни.
Прямые тесты
Какие анализы сдают на сифилис, этот вопрос часто можно услышать от пациентов. Сегодня существует несколько видов тестов, которые могут показать наличие инфекции в крови. Анализ крови на сифилис, известный как темнопольная микроскопия, является современным методом диагностики с достаточно высокой достоверностью результатов. Исследуемый материал изучается при большом увеличении и специальном подсвечивании образца.
Исследование выявляет наличие бледных трепонем (возбудителя сифилиса) на более темном фоне.
При простом исследовании образца под микроскопом достоверность метода составляет 97% и позволяет обнаружить болезнь у 8 из 10 зараженных. Если анализ крови при сифилисе показывает отрицательный результат, но у пациента имеются ярко выраженные клинические симптомы сифилиса, назначается дополнительное исследование.
Самые точные исследования называются ПЦР анализы на сифилис или полимеразная цепная реакция. Для проведения исследования требуется современное медицинское оборудование и квалифицированные специалисты. Где же можно сдать анализы на сифилис по данному методу? К сожалению, анализ ПЦР могут предложить только частные лаборатории. Ввиду сложности проведения и высокой стоимости анализа, немногие лаборатории предлагают исследование с помощью полимеразной цепной реакции.
В предоставленном образце крови определяется наличие или отсутствие молекул ДНК возбудителя болезни. Достоверность ПЦР на сифилис приближена к 100% и является основой для подтверждения или опровержения диагноза лечащим врачом. Современное молекулярное исследование позволяет обнаружить в исследуемом образце наличие всего двух молекул заболевания. Получить самый точный результат ПЦРа на сифилис можно только при соблюдении всех правил и норм лабораторных исследований. Тест на сифилис может быть готов уже через 5 часов после забора крови. Стоит отметить, что общий анализ крови не выявляет данную инфекцию.
Нетрепонемные исследования
Серологическая диагностика сифилиса предусматривает анализ крови на наличие антител. Существует несколько видов исследований, кровь на которые можно сдать в лаборатории. При проведении медицинских осмотров и обследовании большого количества пациентов назначаются, как правило, один из нетрепонемных (неспецифических) анализов. Если в крови обнаруживаются антитела к сифилису, результат анализа считается положительным. Какие анализы на сифилис следует сдавать пациенту, зависит от клинической картины. На сифилис анализ должен быть назначен квалифицированным врачом.
Реакция Вассермана широко распространенный тест, который может показать заражение на 6 неделе болезни. Другое название исследования или «RW». Для проведения анализа необходимо сдать кровь из вены или пальца натощак. Обычно лаборатории проводят забор крови сутра и рекомендуют пациентам воздерживаться ночь (8–12 часов) от еды и напитков, кроме минеральной воды. Реакция Вассермана определяет заражение по количеству титров антител. Отрицательный результат помечается математическим знаком «минус» (-).
Слабоположительный результат маркируется одним или двумя плюсами (+, ++), положительный тремя плюсами (+++) и четыре плюса (++++) означают резко положительную реакцию.
Также к нетрепонемным методам исследований относится RPR тест. Это исследование считается более современным и точным по отношению к RW анализу. RPR проводится на венозной крови пациента и выявляет наличие антител к фосфолипидам цитоплазматической мембраны. РПР тест можно сделать в частной клинике.
Похожим способом является реакция микропреципитаци, которую используют в современных лабораториях.
Микрореакция преципитации (МРП или ) проводится спустя 4–5 недель после предполагаемого заражения. Для исследования используется капиллярная кровь. Микрореакция на сифилис не относится к точным методам диагностики. Положительная серологическая реакция на сифилис по МРА должна быть подтверждена одним из специфических тестов. Отрицательный результат теста означает начальную стадию или отсутствие заболевания.
Трепонемные исследования
Почему нужно сдавать анализ на сифилис повторно? Часто трепонемные исследования используются в качестве контрольного анализа, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз после нетрепонемного теста. Сомнительный результат первого теста означает, что придется сдать анализы на сифилис повторно.
Реакция пассивной агглютинации (РПГА, РНГА). Анализ на сифилис РПГА является быстрым методом исследования, результат можно узнать уже через час. Чтобы проверить кровь на наличие сифилиса по , анализ проводится спустя месяц после контакта с больным. Гемагглютинация может давать ложноположительный результат при мононуклеозе и ряде других заболеваний.
Для диагностики болезни на ранних стадиях применяется Реакция иммунофлюоресценции (). Анализ крови из пальца или вены с помощью РИФ может выявить заболевание спустя 1,5–2 месяца после контакта с больным.
Во время проведения антитела четко выделяются свечением в ультрафиолетовом свете.
При беременности или наличии системных заболеваний соединительной ткани (ревматоидный артрит и пр.) может оказаться ложноположительным. Поэтому очень важно предоставить врачу достоверную информацию о себе и медицинскую карту. Положительная реакция обозначается знаками «+" от одного до четырех.
Реакция иммобилизации бледной трепонемы, также известная как пользуется высокой популярностью. Серодиагностика по методу РИБТ достоверна в 99% случаев. Однако анализы крови могут быть назначены только спустя 12 недель после контакта с носителем болезни.
проводится спустя 3,5–4 месяца после возможного заражения. Заболевание определяется с вероятностью 99%.
Иммуноблотинг способен дать 100% результат и реагирует даже на очень маленькое содержание антител в крови пациента.
Иммуноферментный анализ или ИФА способен выявить болезнь уже спустя 3 недели после возможного заражения. Достоверность положительного результата составляет 98%. Этот анализ называют одним из самых точных. Как же очистить кровь от сифилиса? Как лечат сифилис какие нужны повторные обследования скажет квалифицированный врач. Не занимайтесь самолечением!
Может называться и выглядеть в зависимости от производителя, например, или «Профитест». Тест для самодиагностики не предоставит развернутый анализ, но поможет определить наличие или отсутствие болезни с вероятностью более 98% (при условии, что тест проведен правильно).
Набор РМП на сифилис состоит из пластиковой формы с тестовой полоской, острого инструмента для прокалывания кожи на пальце, одноразовой пластиковой пипетки, бутылочки с раствором для разведения крови и подробной инструкции на русском языке. Перед проведением анализа нужно придерживаться тех же правил, что и в медучреждении, очищать руки и поверхность стола перед работой.
При помощи острого приспособления из набора прокалывают палец, одноразовой пипеткой набирают 1 каплю крови и помещают на обозначенное место . Затем добавляют 2 капли раствора и оставляют на 10 минут. Спустя указанное время, будет готов результат. Какие могут быть варианты? Результата всего два: одна полоса означает отсутствие заболевание, две полосы свидетельствуют о положительной реакции и являются поводом обратиться к врачу.
Подтвердить или опровергнуть результаты домашнего теста может серодиагностика.
Стоит отметить, что тест может показать положительный результат и уже после успешного лечения сифилиса. Все дело в том, что организм помнит о перенесенной инфекции еще несколько лет и продолжает вырабатывать антитела к сифилису. Однако количество этих антител постепенно снижается, и при отсутствии повторного заражения перестают вырабатываться в среднем в течение 2–3 лет после успешного лечения. Однако некоторые факторы могут замедлять этот процесс. К ним относится прием алкоголя и наркотических средств. Поэтому задумываясь, как очистить кровь после сифилиса, в первую очередь откажитесь от вредных привычек.
Лечение
Как избавиться от сифилиса и какое лечение нужно пройти? Сразу стоит отметить, что лечение должен назначать только опытный врач. Терапия от сифилиса проводится с помощью антибиотиков в течение долгого времени. Чтобы кровь очистилась от антител нужно не менее 2 лет. Кровь очищается медленно и постепенно. То есть после полученного лечения антитела вырабатываются все меньше и в конце концов перестают определяться в крови. Чтобы контролировать этот процесс пациентам приходится сдавить анализы в течение 3 лет.
Исследование крови на сифилис обязательно для людей многих профессий (врачи, военные, повара и пр.) для получения допуска к работе. В таком случае постоянно, при каждом медосмотре, будет назначена серология или другой тип анализа. При беременности также обязательно проводится исследование на сифилис, анализы назначает врач. Некоторые типы анализов, например РИФ, часто бывает ложноположительным. Какие сегодня самые точные анализы на сифилис, вам подскажет врач.
Хотите читать всё самое интересное о красоте и здоровье, подпишитесь на рассылку!
Анализ на сифилис, экспресс-методы определения заболевания
Если у вас есть малейшее подозрение на заражение сифилисом, вам надо срочно сдать анализы крови на сифилис. Одним из методов обследования пациента на сифилис является экспресс-диагностика на венерические заболевания (инфекции, передающиеся половым путем). Такой анализ можно сделать у нас в клинике в течении 20 минут.
Главное — необходимо понимать, чем скорее будет поставлен диагноз, тем больший процент вероятности вылечиться без серьезных осложнений на внутренние органы и системы.
Подготовка к сдаче анализа на сифилис
Для того, чтобы анализы на сифилис были более точными, к ним следует подготовиться. Для получения точных результатов анализов крайне важно строгое соблюдение пациентами правил подготовки к лабораторным исследованиям.
Требования для сдачи анализа на сифилис.
Требования для сдачи анализа совсем несложные. Кровь для исследования на сифилис берут натощак. Натощак — это через 12 часов после последнего приема пищи, лучше утром. В крайнем случае – не ранее, чем через четыре часа после еды. Можно пить воду. Накануне забора крови пациенту не следует употреблять алкоголь, наркотические и медикаментозные препараты, принимать жирную пищу. При взятии крови в более ранние сроки после приема пищи, в особенности жирной, а также после употребления алкоголя, могут выпадать неспецифические ложноположительные результаты.
Чтобы не получить ложноположительные результаты (ЛПР), не рекомендуется сдавать анализ во время лихорадочных состояний или непосредственно после перенесенных инфекционных заболеваний.
По тем же причинам не следует брать кровь у женщин — во время менструации, у беременных — в последние две недели перед родами и в ближайшие 10 дней после родов, у новорожденных — в первые 10 дней жизни. Нельзя брать кровь у больных с повышенной температурой, у пациентов ранее 24 часов с момента употребления ими спиртных напитков. Кровь не следует сдавать после рентгенографии, ректального исследования или физиотерапевтических процедур.
Венозная кровь – лучший материал для лабораторных исследований. Кровь для анализа берется из вены, в количестве 5-10 мл. Техника получения венозной крови из локтевой вены не отличается от стандарта взятия крови для других исследований в клинико-диагностической лаборатории.
Методы исследования сыворотки и плазмы крови на сифилис
Один из методов определения заболевания – серологические исследования. Они основаны на выявлении в сыворотке (плазме) крови антител, образующихся в организме больного при заражении сифилитической инфекцией. Такие исследования делят на нетрепонемные и трепонемные. При подозрении на наличие сифилиса серологические реакции являются обязательным компонентом обследования пациентов.
Привычный всем анализ на RW (реакция Вассермана) относится к нетрепонемным тестам. Современные интерпретации этого метода - RPR (быстрый плазмореагиновый тест) и VDRL (определение антител к кардиолипиновому антигену).
Экспресс-анализ на сифилис (это нетрепонемный анализ) не дает точного ответа на вопрос о наличии заболевания сифилиса у пациента. Суть метода состоит в следующем: проводится тест на преципитацию или осаждение с кардиолипиновым агентом. Результат экспресс-анализа на сифилис будет готов спустя 20 минут после забора крови. Если тест показывает положительный результат, то это следует рассматривать как причину для проведения более углубленных исследований (ИФА, РПГА,РИФ,антитела IgM и IgG).
Трепонемный анализ на сифилис представляет собой специфический тест, который выявляет только антитела к возбудителю сифилиса. Один существенный недостаток этого метода – антитела остаются в крови человека и после благополучного лечения, в течение всей оставшейся жизни.
Ложноположительные анализы крови возможны при ревматоидном артрите, ревматизме, туберкулезе, мононуклеозе, у беременных, у пожилых старше 60 лет, у людей с онкологическими, эндокринными, язвой желудка и т.д
Результаты диагностики оценивает врач-венеролог. Окончательный диагноз ставиться только врачом при положительных углубленных анализах .
Экспресс анализ на сифилис – доступная стоимость и быстрый результат.
Стоимость анализа на сифилис зависит от того, какой именно анализ вы хотите провести. Экспресс-анализ, проводимый в нашей клинике, имеет стоимость 1000р. Эта процедура является быстрой и эффективной, поэтому при малейшем подозрении (незащищенный секс, случайная половая связь, изнасилование, наличие подозрительных высыпаний) такой анализ сдать необходимо.
Самый быстрый и достоверный анализ, проводимый методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) — имеет вполне приемлемые цены в клинике «На Ленинском». Этот анализ выявляет как острые, так и латентные инфекции. Сроки получения результата анализа ПЦР на все скрытые инфекции – через 24 часа.
Не стоит рисковать здоровьем – запишитесь на прием к врачу венерологу по телефону: 8 (495) 970-30-92, 8 (985) 970-30-92. Клиника «На Ленинском» и платный венеролог в Москве — быстро, доступно, анонимно.
Трепанема (спирохета) бледная - находится в тканевых щелях, вокруг кровеносных и лимфатических сосудов, в стенках и просветах лимфатических капилляров.
Материалом для исследования служит тканевая жидкость (серум), которую получают различным методом из активных проявлений сифилиса - сифилидов (твердый шанкр, мокнущие, эрозивные папулы, широкие кандиломы и др.) или из пунктата лимфатического узла.
Взятие материала методом раздражения
Поверхность исследуемого объекта (эрозию, мокнущую капсулу и т. д.) осторожно, чтобы не вызвать кровотечения, очищают ватным тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором, и высушивают стерильной марлевой салфеткой.
Подготовленную таким образом поверхность сифилида затем осторожно поглаживают платиновой петлей или лопаточкой так, чтобы не вызвать кровотечения. Через 1-2 минуты после этого на поверхности сифилида выделяется серум, в котором исследуют трепанему.
Взятие материала методом отсасывания
Метод отсасывания заключается в получении серума с поверхности сифилидов при помощи шприца или стеклянной трубочки, соединенной с резиновым баллончиком.
К предварительно обработанной поверхности сифилида плотно прижимают шприц или стеклянную трубочку с резиновым баллончиком и производят насасывание серума.
Взятие материала методом скарификации
Метод скарификации применяют при наличии сифилидов с неповрежденной сухой поверхностью (сухие папулы, розеолы, заэпителизировавшийся шанкр). Скальпелем или платиновой лопаточкой производят скарификацию сифилидов. Появляющееся капиллярное кровотечение останавливают, прижимая стерильный тампон. После этого легким поглаживанием скарификационной поверхности сифилида платиновой петлей получают выделение серума.
Взятие материала методом прижигания
Метод прижигания используют в тех случаях, когда метод скарификации оказался безрезультатным. Он заключается в получении пузыря на поверхности исследуемого сифилида, из которого берут серозное содержимое для исследования на трепанемы.
Прижигание сифилида (розеола, заэпителизировавшийся твердый шанкр) производят раскаленной платиновой петлей с экспозицией 2-3 секунды. На месте прижигания через несколько часов появляется пузырь, из которого получают серум.
Для образования пузыря можно использовать кантаридиновый пластырь, который накладывают размером 1x1 см на розеолезную сыпь кожи живота, бедер, верхних конечностей. Через 16-18 часов на месте наложения пластыря появляется пузырь, содержимое которого исследуют на трепанему.
Взятие материала методом пункции
Метод пункции основан на получении материала для исследования на трепанему из основания шанкра в случае его эпителизации или когда поверхность сифилида скрыта сопутствующим фимозом и т. д., или для получения пунктата лимфатического узла.
Для пункции сифилида необходимы: 2-граммовый стерильный шприц с хорошо притертым поршнем, тонкая игла с тупо срезанным концом. Иглу вкалывают сбоку в основание шанкра или папулы, параллельно их плоскости, после чего несколькими насасывающими движениями поршня получают незначительное количество серума.
Для пункции лимфатического узла необходимо иметь толстую короткую иглу с тупо срезанным концом и 2-х граммовый шприц с хорошо притертым поршнем. Обычно пунктируют регионарный к твердому шанкру лимфатический узел.
В некоторых случаях целесообразно ввести в лимфатический узел 0,1-0,2 мл стерильного физиологического раствора и несколько раз сделать насасывающее движение поршнем для обогащения раствора трепанемами. Из полученного пунктата готовят препарат для исследования.
Все методы получения материала для исследования на бледную трепанему (особенно метод скарификации, прижигания и пункции) связаны с неприятными ощущениями, большей или меньшей болезненностью, у некоторых больных могут быть обморочные состояния.
Поэтому в период проведения указанных методик больного сажают или укладывают в удобное положение. Наготове нужно иметь нашатырный спирт, капли Зеленина. При жалобе больного на легкое головокружение исследование следует временно прекратить.
Ред. проф. В.С. Маята
«Исследование на бледную спирохету, трепанему, методы взятия материала» раздел Методы в дерматологии
Читайте также: