Правила забора материала на серологическое исследование

Обновлено: 27.03.2024

Для предотвращения гемолиза сыворотку следует отделить от сгустка. Сгусток сохраняется в пробирке только при первом заборе и используется для вирусологического и молекулярно-генетического исследований.

Кровь должна быть доставлена в вирусологическую лабораторию в течение первых 24 ч. с момента взятия в термосе или сумке-холодильнике с холодовыми элементами. Транспортируют кровь при температуре от 0 до 8 град. С.

Цельную кровь нельзя замораживать, так как это ведет к полному гемолизу. Кровь становится непригодной для серологических исследований и приобретает токсические свойства для лабораторных животных и тканевых культур.

Добавление консервантов и инактивация материала для вирусологического исследования недопустима.

Сопроводительный документ (направление) тщательно упаковывают в полиэтиленовый пакет и прикрепляют к емкости с клиническим материалом.

Правила отбора и транспортирования материала от больных и подозрительных на заражение людей для исследования на лихорадку Западного Нила

1. Для предохранения от инфицирования медицинского персонала и пациентов при сборе проб биоматериалов и доставке его в лабораторию необходимо:

- не загрязнять наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб;

- не загрязнять сопроводительные документы (направления);

- свести к минимуму непосредственный контакт пробы биоматериала с руками медицинского работника, собирающего и доставляющего его в лабораторию;

- соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;

- собирать пробы в стерильную одноразовую посуду;

- транспортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами.

2. Для серологического исследования необходимо двукратное взятие крови. Первую пробу берут при первых признаках болезни, при подозрении на ЛЗН, вторую - через 10-14 дней после первого забора крови. Кровь забирают в асептических условиях из вены в количестве 5-8 мл в стерильную пробирку и закрывают стерильной пробкой.

3. Для вирусологического исследования берут кровь не позднее 5-го дня болезни, в стадии вирусемии.

4. Кровь должна быть доставлена в вирусологическую лабораторию в течение первых 24 ч. с момента взятия в термосе или сумке-холодильнике с холодовыми элементами. Транспортируют кровь при температуре от 0 до 8 град. С.

Цельную кровь нельзя замораживать, так как это ведет к полному гемолизу. Кровь становится непригодной для серологических исследований и приобретает токсические свойства для лабораторных животных и тканевых культур.

Сопроводительный документ (направление) тщательно упаковывают в полиэтиленовый пакет и прикрепляют к емкости с клиническим материалом.

5. Обработка проб крови для серологического анализа в лаборатории. Кровь центрифугируют в течение 10-15 мин. при 2500 об./мин., сыворотку отделяют от осадка и используют для серологических исследований.

6. При посмертной диагностике берут кусочки мозга (из разных отделов), печени и селезенки. Взятый материал помещают в стерильные флаконы с пробками, которые помещают в полиэтиленовые пакеты, завязывают и опускают в термос со льдом.

7. Если материал для выделения вируса может быть доставлен в лабораторию в течение 2-4 ч., то достаточно поместить его в термос со льдом при температуре от 0 до 8 град. С. В лаборатории кусочки тщательно измельчают и готовят 10%-ю суспензию в растворе Хенкса (или в фосфатно-буферном растворе, или питательной среде), поддерживая температуру обрабатываемого материала на уровне 5 град. С. Суспензию центрифугируют в течение 15 мин. при 2500 об./мин. Прибавляют к надосадочной жидкости пенициллин и стрептомицин по 100-200 ЕД/мл и используют ее для заражения белых мышей или клеточных культур.

Если доставка материала требует нескольких дней, то его транспортируют в термосах с азотом или сухим льдом. В этом случае до замораживания нужно отделить сыворотку крови от сгустка.

8. Для проведения ОТ-ПЦР забор плазмы крови и спинномозговой жидкости проводят не позднее 12 дня от начала заболевания. Материал для обследования методом ПЦР (плазма и/или сыворотка крови, СМЖ, образцы других тканей, моча) должен забираться с использованием только одноразовых пробирок и медицинского инструментария с соблюдением правил асептики и храниться при температуре - 70 град. С или в жидком азоте, не допуская его оттаивания до проведения исследования.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

токсины микроорганизмов и специальные диагностики, в которых содержатся токсины известных микроорганизмов или известные иммуноглобулины.

Серологические методы лабораторной диагностики были предложены в 1886 году французом Видалем для диагностики брюшного тифа (РА). Реакция была основана на обнаружении специфических О и Н антител в сыворотке крови больного брюшным тифом.

При длительно текущих болезнях для более достоверного получения данных применяют метод «парных сывороток», то есть одну и туже реакцию проводят дважды и сравнивают полученные результаты.

В настоящий момент применяют более чувствительные методы серологического исследования, позволяющие обнаружить в крови антител в 10 раз меньше содержания. Эти реакции дают положительный результат в 82%.

Важнейшее место в диагностике занимает иммунно-флюоресцентный метод (ИФ).

Этот метод позволяет выявить возбудителя в исследуемом материале без выделения его в питательной культуре, но, к сожалению, он применяется редко, т.к. дорогостоящ и сложен по проведению.

С помощью серологических реакций идентифицируются микроорганизмы, токсины, а природу антитела в крови больного определяют с помощью известного диагностического антигена.

Основными серологическими реакциями являются:

1. Реакция агглютинации;

2. Реакция преципитации;

3. Реакция связывания комплемента;

4. Реакция иммуно-флооресценции;

5. Реакции лизиса;

6. Реакция нейтрализации вирусов на культуре клеток;

7. Реакция торможения гемоагглютинации;

8. Реакция иммуноферментативного анализа;

9. Реакция иммуноблотинга.

Общие закономерности серологических реакций:

1. Реакции ставят вне организма человека

2. Реакции проявляются при иммунологическом соответствии антигена и антитело в соответствующих оптимальных условиях температуры и кислотности среды.

Иммунные диагностические сыворотки получают от крупных животных, путем многократного заражения или введения токсинов.

К диагностическим сывороткам относятся:

1. Агглютинирующие бактерии;

2. Прецепитирующие бактерии;

3. Гемолизирующие бактерии;

4. Антивирусные сыворотки;

5. Антитоксические сыворотки;

6. Люминесцентные сыворотки;

7. Флюорохромные сыворотки;

К диагностическим антигенам относятся взвеси живых и убитых микроорганизмов и их токсины.

Мы проводим исследования крови на:

Преаналитический этап

1

При исследовании на инфекционные маркеры необходимо соблюдать все правила преаналитического этапа, который включает в себя комплекс мероприятий, выполняемых от назначения на инфекционные маркеры до осуществления лабораторных измерений взятого биоматериала.

Преаналитический этап-это условия, в которых находится пациент перед взятием у него биоматериала, его первичной обработки, хранения и доставки в лабораторию. Соблюдение правильного проведения преаналитического этапа важно, так как до 60% погрешностей в КДЛ по России приходится на преаналитический этап.

Преаналитический этап включает:

  • правильное взятие биоматериала
  • хранение
  • транспортировка

Образец крови для теста на ВИЧ должен забирать квалифицированный сотрудник с применением во всех случаях «универсальных мер предосторожности» против случайной передачи вируса.

При исследовании в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. При плановом назначении лабораторного теста кровь для его выполнения следует брать натощак (после примерно 12ч. голодания и воздержания от приема алкоголя и курения), при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин), в положение пациента лежа или сидя.

Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.

В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определённых добавок. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), цитрата, оксалата, гепарина. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма. В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К2 или К3-ЭДТА). Взятие биоматериала для иммуносупрессантов (такролимус и циклоспорин) проводят в пробирке с ЭДТА, К2 до верхней метки, содержимое пробирки незамедлительно, с осторожным переворачиванием 5-10 раз, перемешать.

1

Для предупреждения контаминации (механический перенос инфекционного агента из одного образца в другой) необходимо строго соблюдать правила забора биоматериала и его транспортировки.

Доставка в лабораторию материала для исследования осуществляется в контейнерах, биксах или сумках-холодильниках. Доставляемые емкости с жидкими материалами должны быть закрыты пробками, исключающими выливание содержимого во время транспортировки. Дно контейнеров содержащих емкости с ПБА (микроорганизмы 3,4 групп патогенности), должно быть покрыто адсорбирующим материалом, контейнера, биксы или сумки-холодильники должны быть промаркированы и иметь международный знак «Биологическая опасность».

Доставка образцов крови происходит с соблюдением всех этапов холодовой цепи. Холодовая цепь – это соблюдение температурного режима от момента взятия биоматериала до лабораторного тестирования.

Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов или оседания сгустка крови (не ранее чем через 30мин. после взятия крови) подвергаются центрифугированию. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при 800-1600 х g .

Несоблюдение правил преаналитического этапа приводит к возникновению неспецифических реакций.

Общие правила по подготовке к исследованиям на ВИЧ-инфекцию, вирусный гепатит В (HbSAg), вирусный гепатит С, сифилис.

  1. кровь сдавать утром натощак;
  2. исключить физические нагрузки в течение 24 часов;
  3. накануне избегать пищевых нагрузок;
  4. исключить курение минимум за 2 часа до исследования;
  5. исключить приём алкоголя накануне исследования;
  6. при себе иметь паспорт или заменяющий его документ с фотографией

Вич-инфекция

1

ВИЧ-инфекция - болезнь, вызванная вирусом иммунодефицита человека-антропонозное инфекционное хроническое заболевание, характеризующееся специфическим поражением иммунной системы, приводящим к медленному ее разрушению до формирования синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД).

Возбудитель ВИЧ-инфекции - вирус иммунодефицита человека - относится к семейству ретровирусов. Вирус преимущественно поражает клетки иммунной системы-Т-лимфоциты, называемые СD4 Т-клетками. СD4 Т-клетки - это субпопуляция лимфоцитов, которая выполняет важнейшие функции в регуляции и осуществлении иммунного ответа организма против бактерий, вирусов и других микроорганизмов. В клетке человека вирус образует участок ДНК, встраивает его в геном хозяина. Пораженная вирусом клетка производит материалы для построения вирусных частиц, на ее поверхности появляются антигены вируса. При делении дочерние клетки получают вирусную ДНК.

К антигенам вируса, расположенным на поверхности клеток, вырабатываются антитела, которые используются для диагностики инфекции. В настоящее время известны 2 типа вируса: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. Считают, что ВИЧ-2 имеет меньшую способность к распространению и медленнее разрушает иммунную систему.

1

Источником ВИЧ-инфекции является человек. Почти во всех биологических жидкостях инфицированного человеческого организма (кровь, сперма, грудное молоко, влагалищный и цервикальный секрет) в различной концентрации обнаруживаются вирусные частицы.

Основным методом лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции является обнаружение антител к вирусу с помощью иммуноферментного анализа. Антитела к ВИЧ появляются у 90-95% зараженных в течение 3-х месяцев после заражения, у 5-9% - через 6 месяцев от момента заражения и у 0,5-1 %- в более поздние сроки. Наиболее ранний срок обнаружения антител-2 недели от момента заражения.

В терминальной стадии СПИД количество антител может значительно снижаться, вплоть до полного их исчезновения. Серологическая диагностика инфекции ВИЧ на первом этапе строится на выявлении суммарного спектра антител против антигенов ВИЧ с помощью твердофазного анализа. На втором этапе методом иммунного блотинга проводится определение антител к отдельным белкам вируса.

1

Гепатит С

1

Гепатит С - вирусное заболевание , характеризующееся поражением печени и аутоиммунными нарушениями, часто имеющее первично-хроническое и латентное течение. Протекает в желтушной (5%) или безжелтушной (95%) формах. Вирус гепатита С относится к семейству флавивирусов, представляет собой небольшой(40-50нм в диаметре), покрытый оболочкой вирус, достаточно устойчивый во внешней среде. Его геном представлен одноцепочечной РНК, которая кодирует 3 структурных и 5 неструктурных белков вируса. К структурным относятся нуклеокапсидный белок(С-core) и гликопротеины оболочки(Е1-Е2). Неструктурную область представляет комплекс белков с ферментативной активностью(NS1,NS2, NS3, NS4,NS5).

Высокая степень генетической изменчивости ВГС способствует «ускользанию» вируса из-под иммунного ответа. С этим связаны трудности в лабораторной диагностике (серонегативный гепатит С).

Протекая бессимптомно, долгие годы остающейся нераспознанной, именно ВГС-инфекция является основной причиной формирования всей группы хронических болезней печени - хронического гепатита, цирроза, гепатоцеллюлярной карциномы.

Источниками ВГС являются больные всеми формами острого и хронического гепатита С. Вирус попадает в кровь при любых парентеральных манипуляциях: гемотрансфузии, инъекциях, при посещении стоматолога и гинеколога, оперативных вмешательствах, зондовом обследовании и т.д. К группе риска относятся больные, находящиеся на гемодиализе, страдающие гемофилией и другими заболеваниями крови, получающие плазму, гемоконцентраты, иммуноглобулины. Наркоманы, употребляющие наркотики внутривенно. Медицинские работники, имеющие контакт с кровью. Относительно меньшее значение имеют половой, бытовой и вертикальный пути передачи, что связано с низкой виремией ВГС.

1

Инкубационный период длится в среднем 6-8 недель с возможными колебаниями от 2-4-х недель до 4-6 месяцев больше. В конце инкубационного периода повышаются уровни печеночных трансаминаз (превышают норму в 5-30раз). Сероконверсия наступает через 15-20 недель от момента заражения. На 3-4 недели раньше анти-ВГС-IgG обнаруживается анти-ВГС-IgM. РНК вируса с помощью ПЦР определяется через 1-3 недели после инфицирования.

Лабораторная диагностика гепатита С основана на обнаружении в образцах сывороток крови человека специфических маркеров вируса гепатита С: антител к антигенам ВГС, относящихся к иммуноглобулинам классов G и M, а так же нуклеиновой кислоты возбудителя (РНК ВГС).

1

Гепатит В

1

Гепатит В (ГВ) - является одним из самых распространенных и опасных вирусных инфекционных заболеваний человека, что обусловлено высокой устойчивостью возбудителя во внешней среде и широким спектром клинико-эпидемиологических особенностей.

Вирусный гепатит В- инфекционное заболевание, которое характеризуется тяжелым воспалительным поражением печени. Источниками возбудителя инфекции являются больные острыми и хроническими формами болезни, а также лица с субклиническим течением инфекционного процесса и здоровые носители.

ГВ передается через кровь и контактным, преимущественно половым путем. Большому риску подвергаются медики, имеющие контакты с кровью. Вирус может передаваться от матери к ребенку во время беременности или непосредственно при родах.

Лабораторная диагностика ГВ основана на выявлении специфических для ГВ антигенов и соответствующих антител в крови, а также вирусных нуклеиновых кислот, основными из которых являются:

  • HBsAg
  • анти-НВs
  • анти-НВс класса IgM и IgG
  • HВe-Ag-антиНВе
  • ДНК | ВГВ

В диагностике ГВ наиболее широко используется определение HBsAg. HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В, основной маркер острого и хронического гепатита В- представляет собой белковую молекулу, ответственную за адсорбцию вируса на поверхности гепатоцитов. После встраивания вируса в геном печеночных клеток они начинают продуцировать вирусную ДНК и белки, и новые молекулы HBsAg поступают в кровь.

1

Данный антиген выявляется как при остром, так и при хроническом заболевании. При остром ГВ поверхностный антиген вируса обнаруживается через 3-5 недель от момента инфицирования, то есть задолго до появления клинических признаков болезни и в этих случаях является единственным серологическим маркером.

Обнаружение поверхностного антигена вируса гепатита В в крови больше 6 месяцев от начала болезни указывает на затяжное или хроническое течение болезни, и позволяет предположить хроническое носительство вируса. Элиминация HBsAg и появление антител к нему является непременным условием выздоровления. Серологическими маркерами репликации ВГВ являются- анти-НВс класса IgM, НвеAg, ДНК и ДНК-полимераза, которые обнаруживаются при остром ГВ с первых дней клинических проявлений или при обострении. HВcAg выявляется в ткани печени и не определяется в сыворотке крови. Опосредованно его присутствие в организме отражают циркулирующие антитела- анти-НВс класса IgM и IgG. В острый период ГВ наличие анти-НВс класса IgM является дополнительным маркером этого заболевания. Наличие в сыворотке крови только анти-НВс класса IgG наблюдается в период между исчезновением HBsAg и образованием анти-HBs. Сочетанное выявление анти-НВс класса IgG в низком титре с анти-НВs указывает на перенесенную ГВ-инфекцию и наличие иммунитета. Тестирование НВеАg проводят в сыворотках крови только с наличием HBsAg и позитивный результат данного маркера свидетельствует об активном процессе - либо подтверждает диагноз острого ГВ, либо свидетельствует об обострении хронического ГВ. Наличие ДНК-ВГВ( наиболее чувствительный маркер продолжающейся репликации ВГВ) в сыворотке крови указывает на высокую инфекционность данного образца и активное размножение вируса в организме. Высокая активность аминотрансфераз сыворотки отражает воспалительное повреждение ткани печени. Сероконверсия HBsAg в анти-HBs происходит у 90-95% больных с острым ГВ в стадии разрешения инфекционного процесса и, является показателем иммунитета к вирусу ГВ, то есть наличие анти-HBs свидетельствует о перенесенной инфекции и наличии иммунитета к этой инфекции. Лица, имеющие эти антитела в защитной концентрации(10МЕ и более), не болеют ГВ и не нуждаются в вакцинации.

Сифилис

1

Сифилис – хроническое инфекционное заболевание, вызываемое Treponemapallidum (бледная трепонема), характеризуется полиорганным поражением и стадийным течением.

Treponemapallidum относится к семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Имеет спиралевидную форму с завитками, грамотрицательный анаэроб. Сифилис , как правило передается половым путем, а важнейшим фактором проникновения бледных трепонем в организм и его инфицирования является нарушение целостности кожных и слизистых покровов и большое количество вирулентных возбудителей. Трансплацентарное заражение или инфицирование новорожденных через родовые пути больных сифилисом матерей, а также при кормлении грудью представляет серьезную опасность и диктует необходимость обследования.

Инкубационный период длится 3-4 недели, первичный серонегативный -1 месяц, затем первичный серопозитивный -1 месяц, затем вторичный период-2-4 года, далее третичный период. В первичном периоде возникает твердый шанкр( безболезненная язва в месте проникновения бледной трепонемы), сопровождающийся регионарным лимфаденитом. В конце первичного периода шанкр самостоятельно заживает, а лимфаденит переходит в полиаденит и сохраняется до пяти месяцев. Началом вторичного периода являются генерализованные высыпания ( пятнистые, папулезные, пустулезные сифилиды). На втором полугодии вторичного сифилиса исчезает полиаденит. Появление третичных сифилидов (бугорков и гумм) знаменует начало третичного периода, который наступает у 40% нелеченных и неполноценно леченных больных. Волны третичного периода разделены более продолжительными периодами латентного течения инфекции. В третичных сифилидах содержится крайне мало трепонем, поэтому они практически не заразны. Передача сифилиса потомству наиболее вероятна в первые три года заболевания. В результате возникают поздние выкидыши (на 12-16 неделе), мертворождение. Ранний и поздний врожденный сифилис. Проявления раннего врожденного сифилиса возникают сразу после рождения и аналогичны проявлениям вторичного сифилиса.

Диагноз сифилиса должен быть подтвержден лабораторными исследованиями, однако, при отрицательном результате скринингового теста обследование пациента с существующим риском недавнего заражения сифилисом следует повторить через 1-2 недели. Образцы, давшие положительный результат в тест-системе для выявления суммарных антител, необходимо проанализировать в системах, выявляющих конкретные классы иммуноглобулинов(JgG и IgM). Положительный результат на JgG и IgM является подтверждением положительного результата, полученного в скрининговом тесте, и свидетельствует о наличии специфических антитрепонемных антител.

Для выявления антител к вирусу ГЛПС, других природно-очаговых инфекций исследуют сыворотку крови 'больных с подозрением на заболевания природно-очаговых инфекций. Первую пробу крови берут при выявлении больного, вторую - через 6-12 дней после первой. Для получения сыворотки кровь забирают из вены шприцем в количестве 3-5 мл и переносят в стерильную пробирку. После образования сгустка кровь направляют в лабораторию или оставляют в холодильнике при температуре +4 градуса С до следующего дня.

В случае невозможности доставить кровь в лабораторию в течение двух суток, необходимо отобрать сыворотку крови стерильной пипеткой и хранить ее в стерильных флаконах с резиновыми пробками (можно в пенициллиновых) в замороженном виде или при температуре +4 градуса С до получения II пробы крови. Затем обе пробы доставляют в лабораторию.

При возникновении трудностей с взятием и транспортировкой нативной крови можно осуществлять забор крови на фильтровальную бумагу. Полоски фильтровальной бумаги шириной 1 см и длиной 12-15 см пропитывают бактериостатическим раствором мертиолята натрия в разведении 1: 1000 и высушивают на воздухе. Высушенные полоски хранят при комнатной температуре в стеклянных пробирках с резиновой или корковой пробкой в стеклянных флаконах в течение 3 месяцев. Полоску фильтровальной бумаги пропитывают кровью из пальца больного (или взятой шприцем венозной кровью). Размер пропитываемой полоски должен составлять 5-6 см. На одного больного необходимо использовать 1-2 полоски. На свободном конце полоски наносят маркировку в виде порядкового номера или фамилии. Затем полоску высушивают в защищенном от солнечных лучей месте, помещают в полиэтиленовый или бумажный пакет и направляют в лабораторию нарочным либо пересылают почтой в конверте вместе с сопроводительным документом. В холодильнике не хранить, т.к. увлажнение фильтровальной бумаги может привести к ложноотрицательным результатам.

В сопроводительном документе должны содержаться следующие сведения: город (район), наименование учреждения здравоохранения, (почтовый адрес, телефон), Ф.И.О., возраст больного, домашний адрес, профессия и место работы (учебы), должность, дата заболевания, дата обращения, диагноз, дата взятия крови.

Результат исследования сообщается телефонной связью на следующий день после получения, а также в письменном виде.

Материал следует направлять по адресу: 680031, Хабаровск, Санитарный переулок, 7, Хабаровская противочумная станция, тел. 33 45 97, 33 46 25.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Об актуальных изменениях в КС узнаете, став участником программы, разработанной совместно с АО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу выдаются удостоверения установленного образца.


Программа разработана совместно с АО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу, выдаются удостоверения установленного образца.

Продукты и услуги Информационно-правовое обеспечение ПРАЙМ Документы ленты ПРАЙМ Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20 "Лабораторная диагностика COVID-19" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)


Обзор документа

Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20 "Лабораторная диагностика COVID-19" (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)

Методические рекомендации № МР 3.1.0169-20
"Лабораторная диагностика COVID-19"
(утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 30 марта 2020 г.)

1. Рекомендации предназначены для специалистов диагностических лабораторий независимо от организационно-правовой формы собственности и заинтересованных сторон, участвующих в лабораторном обследовании лиц на новую коронавирусную инфекцию (COVID-19).

2. Организация лабораторной диагностики COVID-19 осуществляется в соответствии с требованиями санитарного законодательства по работе с микроорганизмами II групп патогенности.

4. К работе с тест-системами для диагностики COVID-19 в лаборатории организаций допускаются специалисты, давшие письменное согласие и прошедшие инструктаж, проведенный сотрудниками лабораторий Роспотребнадзора, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с возбудителями инфекционных заболеваний человека II группы патогенности.

5. Данные о количестве и результатах всех проведенных исследований на COVID-19 (включая исследования, проведенные любыми методами, в том числе приобретенными тест-системами) ежедневно предоставляются лабораториями организаций в центры гигиены и эпидемиологии (и/или филиалы) в субъектах Российской Федерации.

6. В случае получения положительного или сомнительного результата на COVID-19 руководитель лаборатории организации обязан немедленно проинформировать ближайший территориальный орган Роспотребнадзора и в течение 2-х часов передать положительно (сомнительно) сработавший материал в центр гигиены и эпидемиологии в субъекте Российской Федерации.

7. Территориальные органы Роспотребнадзора по субъекту Российской Федерации при получении информации из лаборатории организации о выявлении материала, подозрительного на наличие возбудителя COVID-19 немедленно организуют комплекс противоэпидемических мер по недопущению рисков распространения инфекции, включающих изоляцию и госпитализацию лица, в материале которого определено наличие возбудителя COVID-19, и работу с контактными.

8. Обязательному обследованию на COVID-19 подлежат:

- лица, прибывшие из-за рубежа с наличием симптомов инфекционного заболевания (или при появлении симптомов в течение периода медицинского наблюдения);

- контактные лица с больным COVID-19;

- лица с "внебольничной пневмонией";

- медицинские работники, имеющие риск инфицирования (скорая (неотложная) медицинская помощь, инфекционные отделения, отделения для больных внебольничной пневмонией) 1 раз в неделю (до появления IgG);

- лица старше 65-ти лет при появлении респираторных симптомов;

- лица при появлении респираторных симптомов, находящиеся в закрытых коллективах (интернаты, пансионаты для пожилых и другие учреждения).

9. Диагноз COVID-19 устанавливается после лабораторного подтверждения на базе учреждений Роспотребнадзора.

Выписка больных COVID-19 проводится при получении 2-х отрицательных результатов лабораторных исследований с промежутком не менее 1 суток.

Контактные с больным COVID-19 лица обследуются дважды: в день начала медицинского наблюдения (в кратчайшие сроки с момента установления медицинского наблюдения) и при отсутствии клинических проявлений за период медицинского наблюдения - на 10-12-е сутки наблюдения. При появлении (выявлении) клинических симптомов обследуются немедленно.

10. Научно-исследовательские работы с возбудителем COVID-19 могут проводиться только в лабораториях, имеющих санитарно-эпидемиологическое заключение на работу с возбудителями инфекционных болезней человека II группы патогенности.

11. Материал для лабораторных исследований:

- респираторный материал для ПНР исследования (мазок из носоглотки и ротоглотки и мокрота (при наличии) и/или эндотрахеальный аспират или бронхоальвеолярный лаваж);

- сыворотка крови для серологического исследования (на 1-й и 14-й день);

- для посмертной диагностики используют аутоптаты легких, трахеи и селезенки.

12. Сбор клинического материала и его упаковку осуществляет работник медицинской организации, обученный требованиям и правилам биологической безопасности при работе и сборе материала, подозрительного на зараженность микроорганизмами II группы патогенности.

Каждый образец материала помещают в отдельную транспортную емкость, обеспечивая требования в соответствии с таблицей настоящих методических рекомендаций.

Образцы материала от людей, подлежащие сбору для лабораторной диагностики COVID-19

Тип образца Требования к сбору материала Транспортировка Условия хранения до тестирования Комментарии
Мазок с носоглотки и зева(ротоглотки) Пластиковые пробирки и тампоны для мазков** 4°С 5дней*: -70°С Носоглоточные и орофарингеальные тампоны должны быть помещены в одну пробирку для увеличения вирусной нагрузки
Бронхоальвеолярный лаваж Стерильный контейнер 4°С 48 часов*: -70°С Возможно небольшое разведение образца**
Эндотрахеальный аспират, аспират носоглотки или смыв из носа Стерильный контейнер 4°С 48 часов*: -70°С 44
Мокрота Стерильный контейнер 4°С 48 часов*: -70°С Убедитесь, что материал поступает из нижних дыхательных путей
Ткани биопсии или аутопсии, включая легкие Стерильный контейнер с транспортной средой** 4°С 24часа*: -70°С Для обнаружения вируса**
Сыворотка (две пробы: острая фаза и через 2 недели после острой фазы) Пробирки для разделения сыворотки 4°С Острая фаза - первая неделя болезни

* при невозможности обеспечить хранение при минус 70°С, образцы хранить при минус 20°С;

** для транспортировки образцов используют транспортную среду для хранения и транспортировки респираторных мазков или физиологический раствор (при условии транспортировки до лаборатории не более 24 часов после взятия образца) или сухой зонд-тампон (при условии транспортировки до лаборатории не более 4 часов после взятия образца).

13. Все образцы, собранные для лабораторных исследований, должны рассматриваться как потенциально инфекционные, и медицинский персонал, который собирает или перевозит клинические образцы, должен строго соблюдать требования биологической безопасности как при работе с микроорганизмами II группы патогенности.

Медицинские работники, которые собирают образцы, должны использовать соответствующие средства индивидуальной защиты (СИЗ).

Медицинские работники, выполняющие аэрозольные процедуры (например, аспирацию или открытое отсасывание образцов дыхательных путей, интубацию, сердечно-легочную реанимацию, бронхоскопию), используют:

- респираторы типа FFP3 или эквивалент, или более высокий уровень защиты (пневмошлем);

- очки для защиты глаз или защитный экран;

- противочумный халат и перчатки, водонепроницаемый фартук при проведении процедур, где ожидается, что жидкость может попасть на халат или специальные защитные комплекты.

Необходимо ограничить число лиц, присутствующих в комнате, до минимума, необходимого для сбора образцов. Обязательно следовать требованиям санитарных правил по использованию СИЗ.

Все используемые материалы должны быть утилизированы надлежащим образом. Дезинфекция рабочих зон и обеззараживание возможных разливов крови или инфекционных жидкостей организма должны проводиться в соответствии с утвержденными процедурами с использованием дезинфекционных средств на основе хлора.

14. При выявлении положительных результатов первичного исследования, материал от больного направляют на подтверждающее тестирование в определенные Роспотребнадзором лаборатории на базе центров гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора в субъектах Российской Федерации или на базах научно-исследовательских организаций Роспотребнадзора.

Единичный отрицательный результат теста, особенно если это образец из верхних дыхательных путей, не исключает инфекции.

Обнаружение любого другого патогена в образцах от больного не исключает заболевания COVID-19.

При повторном положительном результате исследования материала, отобранного у одного и того же лица, при наличии подтверждения предыдущего положительного результата, подтверждения в Референс-центре не требуется.

15. Перевозка образцов должна осуществляться в соответствии с требованиями санитарного законодательства по отношению к микроорганизмам II группы патогенности.

15.1. Все клинические образцы (сыворотка крови, смывы и мазки, и др.) направляются в Референс-центр в пробирках объемом 1,5-2,0 мл.

15.2. Пробирки должны иметь завинчивающиеся крышки с внешней резьбой и уплотнительным кольцом, исключающим протекание биологической жидкости.

15.3. На пробирке указывается фамилия, имя, отчество пациента, вид образца, дата сбора образца

15.4. Пробирки с образцами от одного пациента помещаются в зип-пакет размером 5x7 см или 6x8 см с ватой (или другим гигроскопичным материалом) в количестве, достаточном для адсорбции всего образца в случае его утечки. На пакете указывается фамилия, имя, отчество пациента, дата сбора образцов (например, Иванов И.И., 19.02.2020 г.). Не допускается упаковывание образцов материалов от разных людей в один и тот же зип-пакет.

15.5. Зип-пакеты помещаются в герметичный металлический контейнер. На контейнере указывается наименование организации (НИО или ЦГиЭ в субъекте Федерации) и фамилии пациентов.

15.6. Металлические контейнеры помещают в термоизолирующие пенопластовые коробки (термоконтейнеры, сумки-термосы). В термоконтейнеры и сумки-термосы помещают охлаждающие элементы. К наружной стенке термоконтейнера или термоса прикрепляют этикетку с указанием вида материала, условий транспортирования, названия пункта назначения и отправителя.

15.7. Условия транспортирования проб:

- при температуре от 2 до 8°С - в случае, если контейнер будет доставлен в референс-центр в течение 3 суток;

- при температуре минус 70°С - в случае, если контейнер будет доставлен в референс-центр в срок, превышающий 3 суток.

Не допускается замораживание-оттаивание материала.

В отдельный полиэтиленовый пакет вкладывают сопровождающие документы, включая информацию о пациенте, пакет укладывается внутрь термоконтейнера или сумки-термоса. Пример:

Дата поступления Кто направил ФИО Возраст Регион, откуда прибыл Предварительный диагноз или симптомы Вид материала
19.02.2020 ЦГиЭ в N-ской области Иванов И.И. 50 лет КНР, Пекин ОРВИ Мазок с носоглотки и зева
сыворотка крови

16. Результаты лабораторных исследований оформляются соответствующими документами в установленном порядке и направляются в адрес организации, направившей материал.

17. При получении положительных результатов на вирус SARS-CoV-2 на любом из этапов диагностики информация немедленно направляется в территориальные органы Роспотребнадзора.

Руководитель
Федеральной службой по надзору
в сфере защиты прав потребителей
и благополучия человека, Главный
государственный санитарный врач
Российской Федерации
А.Ю. Попова

Обзор документа

Роспотребнадзор выпустил рекомендации о лабораторной диагностике коронавируса, которые содержат:

- условия допуска к работе с тест-системами;

- порядок учета полученных в ходе диагностики данных;

- перечень лиц, которые подлежат обязательному обследованию;

- виды образцов материала от людей, подлежащих сбору для лабораторной диагностики.

Для просмотра актуального текста документа и получения полной информации о вступлении в силу, изменениях и порядке применения документа, воспользуйтесь поиском в Интернет-версии системы ГАРАНТ:

Читайте также: