Инструкция по забору транспортировке и хранению биологического материала
Обновлено: 29.04.2024
Государственное бюджетное учреждение здравоохранения
Тюменской области "Областная клиническая больница №1"
Нам доверяют самое ценное!
Правила взятия, доставки биологических материалов для основных микробиологических исследований в лаборатории клинической микробиологии
Правила взятия, доставки биологических материалов для основных микробиологических исследований в лаборатории клинической микробиологии
- производят в стерильные пробоотборники (пробирки, контейнеры, флаконы и др. посуду) до начала антибактериальной терапии;
- доставляют с соблюдением сроков доставки (без транспортных сред) не позднее 2 часов с момента взятия, без переохлаждения.
ИССЛЕДОВАНИЕ КРОВИ.
Взятие материала производит процедурная медицинская сестра в кабинете или палате с соблюдением асептики во время подъема температуры тела (37,2-380С) во флаконы с питательной средой.
Подготовка флаконов: визуально убедиться в целостности флакона и пробки, защитного колпачка; в прозрачности бульона, проверить цвет сенсора (сенсор должен быть голубовато-зеленый или серый, но не желтый; при наличии желтой окраски флакон не используется).
Удалить защитный колпачок, продезинфицировать пробку 70%-ым раствором спирта или раствором йода, дать высохнуть перед контактом с иглой.
Подготовка кожи: обработать место венепункции 70% раствором спирта в течение не менее 30 секунд. Затем нанести на кожу вокруг места венепункции 1-2% раствор йода концентрическими кругами (диаметр зоны обработки – около 3-5 см). Продолжительность обработки – не менее 30 секунд. Если используется раствор спирта, время обработки – не менее 60 секунд. Дать коже высохнуть перед венепункцией. Не пальпировать вену после обработки. При необходимости пальпации использовать стерильные перчатки.
Произвести венепункцию, используя шприц, набрать необходимое количество крови.
Внести во флаконы необходимое количество крови в соответствии с инструкцией (для флаконов SA, SN, FA, FN рекомендуется вносить до 10 мл); PF (педиатрические аэробные) - от 0,5 до 4 мл крови.
При использовании шприца на 20 мл рекомендуется сначала внести кровь в анаэробный флакон, затем – в аэробный.
Не проталкивать кровь во флакон принудительно при помощи поршня – жидкость легко поступает во флакон, поскольку в нем отрицательное давление воздуха (вакуум). В вечерние и ночные часы, в воскресенье флаконы с кровью помещать в термостат на 350С или хранить при комнатной температуре до утра. В направлениях дополнительно указывать температуру тела в момент взятия крови.
ИССЛЕДОВАНИЕ СОСУДИСТЫХ КАТЕТЕРОВ.
Взятие материала производит врач.
Область кожи вокруг катетера обрабатывают тампоном с 70% спиртом. В условиях асептики извлекают катетер и стерильными ножницами отрезают 5 см дистального конца катетера в стерильную пробирку или флакон.
При невозможности доставить в течение 2 часов рекомендуется хранить при +40С до 24 часов.
ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ.
Взятие материала производит пациент. У лежачих пациентов – медицинская сестра.
Собирается моча после туалета наружных половых органов утренняя (накопительная) средняя порция мочи в количестве 3-5 мл. Катетеризация не рекомендуется.
При наличии постоянного катетера необходимо: пережать трубку ниже уровня отверстия уретры на 1-3 см, продезинфицировать трубку спиртовым тампоном и с помощью шприца с иглой взять до 5 мл мочи в стерильный пробоотборник (контейнер), снять зажим с катетера.
Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
При уретрите, цистите – доставляют первую порцию мочи.
ИССЛЕДОВАНИЕ МОКРОТЫ.
Взятие материала производит пациент под контролем медицинской сестры.
Перед взятием почистить зубы, прополоскать рот свежей кипяченой водой. Утреннюю (накопительную) мокроту без слюны в количестве 1-5 мл собрать в прозрачный контейнер. Доставлять не позднее 2 часов с момента забора.
ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОМЫВНЫХ ВОД БРОНХОВ.
Взятие материала производит врач.
В стерильную пробирку - в количестве до 3-5 мл. Доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО НОСА.
1. При ЛОР заболеваниях. Взятие материала производит врач.
Достовернее пунктат из пазух носа в шприце или стерильной пробирке (менее информативно) - стерильным ватным тампоном из средних (по показаниям – глубоких) отделов, предварительно освободив нос от слизи.
2. На носительство золотистого стафилококка. Взятие материала производит обученный медицинский персонал. Из передних отделов слизистой полости носа одним тампоном из обоих носовых ходов, не касаясь кожи носа. Доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ЗЕВА.
Взятие материала производит врач или обученный медицинский персонал.
Натощак или через 2 часа после приема пищи, жидкости. Необходимо хорошее освещение, корень языка придавить шпателем. Не касаться слизистой рта, языка!
1. На микрофлору, на носительство золотистого стафилококка - ватным тампоном обтереть слизистую правой миндалины, дужки, язычка, левой миндалины, задней стенки глотки. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
2. На возбудителей дифтерии – из зева: при наличии налетов на границе здоровой и пораженной ткани. При отсутствии налетов – как на микрофлору. Одновременно - из носа: отделяемое слизистой носа тампоном из обоих носовых ходов.
При подозрении на дифтерию (по цито) - 2 или 3 тампона из зева для прямой бактериоскопии, постановки опыта на токсигенность, посева. По показаниям - из мест редкой локализации: отделяемое глаз, уха, ран, другое. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия. В вечерние и ночные часы, воскресенье материал опускать в теплую среду обогащения или транспортную среду с активированным углем, хранить в термостате +350С или комнатной температуре до утра.
3. На менингококк – взятие с посевом у постели больного или в лаборатории производит медицинский лабораторный техник с задней стенки носоглотки ватным тампоном, изогнутым под углом 45о в нижней части его длины о пробирку. Доставка немедленно в теплом контейнере!
4. На коклюш – взятие с посевом у постели больного или в лаборатории производит медицинский лабораторный техник изогнутым ватным тампоном под углом 45о (тампон вниз) с задней стенки глотки Доставка немедленно в теплом контейнере!
5. На микоз (грибы) - ватным тампоном с пораженных участков слизистой. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ЛИКВОРА.
Взятие материала производит врач.
С соблюдением асептики брать последние порции ликвора в количестве 1-3 мл в стерильную пробирку (края пробирки обжечь до взятия и после над спиртовкой). Доставлять немедленно в теплом пенале. Вне часов работы лаборатории - помещать в термостат на 35°С до утра.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО РАН.
Взятие материала производит врач, перевязочная медицинская сестра.
РАНЫ ПОВЕРХНОСТНЫЕ: во время перевязки кожу вокруг раны предварительно обработать раствором антисептика; некротические массы, детрит, гной удалить стерильной салфеткой. Взятие материала производить последовательно двумя ватными тампонами круговыми вращательными движениями от центра к периферии. Один тампон - для бактериоскопии, второй - для посева. По Cito! - 3 тампона: для бактериоскопии, посева и постановки чувствительности к антибиотикам.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ГЛАЗ.
Взятие материала производит врач.
За 5-6 часов до взятия отменить все процедуры и манипуляции. Раздельно из каждого глаза ватным тампоном со слизистой конъюнктивы от наружного к внутреннему краю, не касаясь кожи. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО УШЕЙ.
Взятие материала производит врач.
При поражении наружного уха обработать кожу 70° спиртом с последующим промыванием физиологическим раствором натрия хлорида. Затем отделяемое из очага взять ватным тампоном.
Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
При поражении среднего, внутреннего уха доставляют пунктаты и материал, полученный во время оперативных вмешательств, собранный в стерильную посуду.
Вне часов работы лаборатории материал берется в среду обогащения или коммерческие накопительные среды (Амиеса, тиогликолиевая и др.) и хранится в термостате при 35' С или комнатной температуре в течение 24-48 часов (см. раневое отделяемое).
ИССЛЕДОВАНИЕ ЖЕЛЧИ.
Взятие материала производит процедурная медицинская сестра.
При зондировании после взятия желчи в клиническую лабораторию порции в стерильные пробирки в количестве 3-5 мл (чаще исследуется порция В, реже - порция С), либо во время операции с помощью шприца, соблюдая правила асептики. Доставлять в течение 2 часов.
ИССЛЕДОВАНИЕ ГРУДНОГО МОЛОКА.
Взятие материала производит пациентка под контролем медицинской сестры.
С соблюдением правил асептики, после туалета молочных желез, предварительно сцедив первые капли в салфетку. Доставлять в стерильных пробоотборниках (контейнерах) в количестве 1-3 мл в течение 0,5-1 часа.
ИССЛЕДОВАНИЕ ОТДЕЛЯЕМОГО ПОЛОВЫХ ОРГАНОВ.
Взятие материала производит врач.
1. НА НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ВОЗБУДИТЕЛИ:
«С» канал - ватным тампоном в зеркалах до мануального исследования предварительно обработав влагалищную часть ватным тампоном, смоченным физиологическим раствором натрия хлорида, не касаясь стенок влагалища.
Вульва - до манульного исследования, после введения зеркала и подъемника брать ватным тампоном с патологически измененных участков.
Отделяемое уретры - после туалета наружных половых органов брать ватным тампоном, не касаясь кожи.
Доставлять в течение 2 часов с момента забора.
По показания параллельно с взятием материала врач-гинеколог (врач-уролог) готовит препараты («мазки») на предметном стекле, используя отдельные стерильные ватные тампоны или гинекологические инструменты, равномерно распределяя материал без грубого втирания и резких штриховых движений.
2. НА МИКОПЛАЗМОЗ, УРЕАПЛАЗМОЗ - посев материала (соскоб из уретры, заднего свода влагалища, канала шейки матки) в пробирки осуществляют ложкой Фолькмана или тампоном однократного применения. Пробирки доставляют в лабораторию не позднее 2 часов с момента взятия.
- у мужчин отделяемое слизистой берут петлей или ложкой Фолькмана из глубины уретры, предварительно очистив отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. При малом количестве выделений до взятия материала производят массаж уретры в дистальном направлении. При заболевании предстательной железы исследуют ее сок.
- у женщин из шейки матки материал берут после введения во влагалище зеркала Куско. Шейку вытирают, удаляют наружную слизисто – гнойную пробку (вагинальный конец) и из отверстия шейки матки корнцангом или вагинальным пинцетом берут вязкую слизь.
- у мужчин отделяемое слизистой оболочки берут петлей или ложкой Фолькмана из глубины уретры, предварительно очистив отверстие тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия. При малом количестве выделений до взятия материала производят массаж уретры в дистальном направлении. При заболевании предстательной железы исследуют ее сок.
- у женщин из шейки матки материал берут после введения во влагалище зеркала Куско. Шейку вытирают, удаляют наружную слизисто-гнойную пробку (вагинальный конец) и из отверстия шейки матки корнцангом или вагинальным пинцетом берут вязкую слизь (для беременных женщин взятие из экзоцервикса), не допуская загрязнение исследуемого материала микрофлорой влагалища.
ИССЛЕДОВАНИЕ ИСПРАЖНЕНИЙ.
Взятие материала производит медицинская сестра.
1. На патогенные энтеробактерий (шигеллы, сальмонеллы, эшерихий) - из судна без следов дезинфицирующих растворов брать слизь, зелень, фекалий в стерильную посуду или в пробирку с транспортными средами (глицериновый консервант, Кэри-Блейра или другие коммерческие накопительные среды) в объеме не более 1/3 от среды.
Нативный фекалий (без транспортной среды) - доставлять в течение 2 часов с момента взятия.
Вне часов работы лаборатории хранить в холодильнике +40С в глицериновом консерванте до 16-24 часов, среде Кэри-Блейра и других коммерческих средах – до 48 часов.
2. На дисбактериоз, грибы, патогенный стафилококк, УПМ (условно-патогенную микрофлору), иерсинии – из судна с соблюдением асептики 1-2 г нативного фекалия в стерильные контейнеры с лопаточкой. Доставлять не позднее 2 часов с момента взятия.
3. На возбудителей холеры – 0,5-1,5 г нативный фекалий (доставлять не позднее 2 часов с момента взятия), при невозможности доставить в требуемые сроки - в холерный консервант (хранить в термостате 350С до 6 часов).
4. На выявление антигенов лямблий; хеликобактера; рота-, нора- и аденовирусов, токсинов клостридий иммунохроматогенным методом (экспресс-метод) - нативный фекалий 0,5-1,5 г в чистой стеклянной посуде.
Каждая проба сопровождается документом - направлением, где указывают: фамилию, имя, отчество пациента; год рождения; отделение, в котором он находится; номер истории болезни (амбулаторной карты); диагноз; материал, посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату и время взятия материала; антибактериальные (иммунные) препараты, если проба берется на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего пробу на исследование.
Часы работы лаборатории клинической микробиологии: с 8.00 до 15.30 часов, в субботу - с 8.00 до 14.00 часов, выходной - воскресенье.
Амбулаторные пациенты исследуемый материал доставляют самостоятельно на 9 этаж административного корпуса больницы.
Из отделений материал доставляется в оперативный отдел.
Условия хранения образцов биоматериалов, взятых у пациентов, определяются стабильностью в этих условиях искомых аналитов. Максимально допускаемая нестабильность, выраженная в процентном отклонении результата после хранения от исходного уровня, не должна превышать половины размера общей ошибки определения, рассчитываемой из суммы биологической и аналитической вариации данного аналита. Максимально допускаемое время хранения измеряется периодом времени, в течение которого в 95% образцов содержание аналита сохраняется на исходном уровне.
Стабильность аналитов в различных видах образцов (крови, мочи, спинномозговой жидкости) и проб (сыворотке, плазме, осадке, мазке крови) неодинакова [2] (см. приложения Б, В, Г). Данные о стабильности проб следует учитывать и при их хранении после поступления в лабораторию. В отношении аналитов, нестабильных на свету, должны быть соблюдены соответствующие предосторожности (сбор материала в темную посуду, защита образца от прямого света).
3.5.1 Биологический материал - кровь
Содержание электролитов, субстратов, некоторых ферментов может не изменяться при хранении образцов сыворотки крови при температуре холодильника 4 °С в течение до четырех дней. Гемоглобин, эритроциты стабильны в течение одного дня при хранении в закрытой пробирке. Хранение образцов плазмы крови, предназначенной для исследований свертывающей системы, в условиях комнатной температуры более 4 ч не рекомендуется.
Исследование газов крови следует проводить немедленно; при невозможности неотложного исследования - образцы в закрытых стеклянных контейнерах могут храниться в бане с ледяной водой до 2 ч.
При транспортировании в лабораторию контейнеры с образцами крови следует предохранять от тряски во избежание развития гемолиза. Температура ниже 4 °С и выше 30 °С может существенно изменить содержание в образце многих аналитов. Образцы цельной крови пересылке не подлежат.
3.5.2 Биологический материал - моча
Собранную мочу как можно быстрее доставляют в лабораторию. Длительное хранение мочи при комнатной температуре приводит к изменению физических свойств, разрушению клеток и размножению бактерий. Моча, собранная для общего анализа, может храниться не более 1,5-2,0 ч обязательно в холодильнике, применение консервантов нежелательно, но допускается, если между мочеиспусканием и исследованием проходит более 2 ч. Наиболее приемлемый способ сохранения мочи - охлаждение (можно хранить в холодильнике, но не замораживать). При охлаждении не разрушаются форменные элементы, но возможно влияние на результаты определения относительной плотности.
3.5.3 Биологический материал - спинномозговая жидкость
При исследовании в пределах 1 ч пробу не охлаждают. Для транспортирования проб СМЖ используют закрытые пробирки. При исследовании в пределах трех часов - хранить на льду, не замораживать, не фиксировать, не добавлять консерванты. Транспортирование следует осуществлять как можно скорее в связи с нестабильностью клеток. Для цитологических исследований следует отсылать препараты, полученные путем цитоцентрифугирования пробы СМЖ (20 мин при 180 g), которые стабильны в течение 4-6 дней при комнатной температуре. Для длительного хранения после отделения клеток с помощью центрифугирования пробу следует быстро заморозить до минус 70 °С в тщательно закупоренном полипропиленовом сосуде.
3.5.4 Доставка в лабораторию биоматериалов для микробиологического исследования
Доставка в лабораторию любого образца биоматериала, предназначаемого для микробиологического исследования, должна длиться не более двух часов после взятия материала. Даже наиболее совершенная транспортная система не может служить заменой быстрому транспортированию и немедленному исследованию образца. Требования к транспортированию и хранению бактериологических проб приведены в таблице 3. Если соблюдение этих условий не может быть обеспечено, рекомендуется инокуляция во флакон для культур крови или в гемофлакон или, например, для проб мочи, использование погружных слайдов.
Таблица 3 - Условия транспортирования и хранения образцов различных биоматериалов для бактериологических исследований
ГОСТ Р 53079.4-2008
НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Технологии лабораторные клинические
ОБЕСПЕЧЕНИЕ КАЧЕСТВА КЛИНИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
Правила ведения преаналитического этапа
Clinical laboratory technologies. Quality assurance of clinical laboratory tests. Part 4. Rules for conducting of preanalytical stage
Дата введения 2010-01-01
Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения"
Сведения о стандарте
1 РАЗРАБОТАН Лабораторией проблем клинико-лабораторной диагностики Московской медицинской академии им. И.М.Сеченова Росздрава, кафедрой биохимии Российской медицинской академии последипломного образования Росздрава
2 ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 466 "Медицинские технологии"
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает требования к условиям и процедурам ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований с целью исключения или ограничения влияния эндогенных, экзогенных, ятрогенных и иных факторов, мешающих правильному отражению состояния внутренней среды обследуемых пациентов в результатах клинических лабораторных исследований.
Настоящий стандарт может использоваться всеми организациями, учреждениями и предприятиями, а также индивидуальными предпринимателями, деятельность которых связана с оказанием медицинской помощи.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие национальные стандарты:
ГОСТ Р ИСО 15189-2006 Лаборатории медицинские. Специальные требования к качеству и компетентности
ГОСТ Р ИСО 15190-2007* Лаборатории медицинские. Требования к безопасности
* Вероятно ошибка оригинала. Следует читать ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования к безопасности, здесь и далее по тексту. - Примечание изготовителя базы данных.
Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.
3 Правила ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований
3.1 Общие положения
Достоверность отражения в результатах лабораторных исследований состояния внутренней среды пациента, содержания искомых компонентов биологических материалов в значительной степени зависит от условий, в которых пациент находился в период, предшествовавший взятию у него образца биоматериала, от условий и процедур взятия образца, его первичной обработки и транспортирования в лабораторию, то есть от факторов преаналитического этапа клинического лабораторного исследования.
С целью исключения или ограничения влияния внелабораторных факторов преаналитического этапа на результаты лабораторных исследований настоящий стандарт регламентирует:
а) условия периода, предшествующего взятию у пациента образца биологического материала (приложение А);
б) условия и процедуры взятия образца биологического материала у пациента;
в) процедуры первичной обработки образца биологического материала;
г) условия хранения и транспортирования образцов биоматериалов в клинико-диагностические лаборатории.
Требования стандарта основаны на:
а) научных данных о постоянных и переменных факторах физического, химического и биологического характера, способных оказать влияние на содержание веществ и клеток в биологических материалах пациентов;
б) обобщенных данных о стабильности компонентов в образцах биологических материалов после их взятия при различных условиях хранения (приложения Б, В, Г);
в) обобщенных данных о влиянии принимаемых пациентом лекарственных средств на результаты лабораторных исследований (приложение Д);
г) требованиях ГОСТ Р ИСО 15189 (раздел 5.4).
Правила предназначены для обеспечения такого качества ведения преаналитического этапа клинических лабораторных исследований, которое необходимо для получения их результатов, достоверно отражающих состояние внутренней среды обследуемых пациентов в момент обследования, путем:
- правильной подготовки пациентов к проведению лабораторных тестов;
- информирования пациентов о требуемых ограничениях в диете, физической активности, курении, о правилах сбора биологических материалов, которые обычно собирает сам пациент (моча, кал);
- инструктирования персонала, участвующего во взятии образцов биологических материалов у пациентов, об особенностях процедур взятия различных видов этих материалов;
- рациональной организации процесса взятия образцов биоматериалов;
- полноценного обеспечения процедур взятия образцов биоматериалов необходимыми инструментами, посудой, средствами первичной обработки и транспортировки.
Принимая во внимание потенциальную биоопасность образцов биологического материала, получаемого от пациентов, персонал, выполняющий эти функции, должен быть информирован и обучен правилам безопасного взятия образцов и должен располагать средствами защиты (перчатки, устройства для безопасного сбора использованных игл и т.п.) в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 15190.
Настоящие правила содержат общие положения, которые по отношению к отдельным биологическим материалам и отдельным изучаемым в них аналитам, биологическим объектам могут требовать особых условий и процедур, что должно быть отражено в нормативных документах по технологиям оказания соответствующих простых или комплексных медицинских услуг, применительно к функциям различных категорий клинического персонала.
На основании этих общих правил в каждой медицинской организации следует разрабатывать и вводить для обязательного исполнения внутренние правила ведения преаналитического этапа применительно к каждому виду исследований, выполняемых в лаборатории, учитывающие особенности медицинского профиля и организационной формы учреждения. В случае выполнения исследований в лаборатории другого учреждения правила ведения преаналитического этапа, включая условия транспортирования образцов, применительно к этим исследованиям следует согласовывать с руководителем лаборатории, выполняющей эти исследования. Наличие и исполнение персоналом правил ведения преаналитического этапа лабораторных исследований является одним из обязательных условий при сертификации процессов выполнения исследований в клинико-диагностической лаборатории.
3.2 Требования к условиям и процедурам взятия образца биологического материала
Взятие образца или пробы - это процесс изъятия или образования проб, охарактеризованный процедурой их взятия, то есть оперативными требованиями и/или инструкциями для отбора, изъятия и подготовки одной или нескольких проб из инспектируемого лота для выяснения характеристик этого лота (в лабораторной медицине инспектируемый лот - это обследуемый пациент, а образцы или пробы - это порции того или иного биологического материала).
3.2.1 Биологический материал - кровь
Большая часть клинических лабораторных исследований проводится в образцах крови: венозной, артериальной или капиллярной. Венозная кровь - лучший материал для определения гематологических, биохимических, гормональных, серологических и иммунологических показателей.
Для исследования аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. Показания для взятия крови из пальца на клиническое исследование крови:
- при ожогах, занимающих большую площадь поверхности тела пациента;
- при наличии у пациента очень мелких вен или когда они труднодоступны;
- при выраженном ожирении пациента;
- при установленной склонности к венозному тромбозу;
При взятии образца крови из венозного или артериального катетера, через который проводилось вливание инфузионного раствора, катетер следует предварительно промыть изотоническим солевым раствором в объеме, соответствующем объему катетера, и отбросить первые 5 мл (миллилитров) взятой из катетера крови. Недостаточное промывание катетера может привести к загрязнению образца крови препаратами, вводившимися через катетер. Из катетеров, обработанных гепарином, нельзя брать образцы крови для исследований системы свертывания крови.
В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определенных добавок [1]. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты, цитрата, оксалата, гепарина [2]. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма (в точном соотношении одной части 3,8%-ного (0,129 моль/л) раствора цитрата натрия и девяти частей крови). В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К или К-ЭДТА). Для получения сыворотки кровь собирают без антикоагулянтов. Для исследования глюкозы кровь собирают с добавлением ингибиторов гликолиза (фтористого натрия или йодоацетата).
Для исследования ряда нестабильных гормонов (остеокальцина, кальцитонина, адренокортикотропного гормона) используют ингибитор апротинин.
Для получения из образцов крови вариантов проб для различных видов исследований рекомендуется следующая последовательность наполнения пробирок:
- кровь без добавок - для получения гемокультуры, используемой в микробиологических исследованиях;
- кровь без антикоагулянтов - для получения сыворотки, используемой при клинико-химических и серологических исследованиях;
- кровь с цитратом - для получения плазмы, используемой при коагулологических исследованиях;
- кровь с гепарином - для получения плазмы, используемой при биохимических исследованиях;
- кровь с ЭДТА - для получения цельной крови, используемой для гематологических исследований, и плазмы, используемой для некоторых клинико-химических исследований.
С целью сохранения в образце крови эритроцитов применяют смесь антикоагулянтов с добавками, например, АЦД (антикоагулянт - цитрат-декстроза или кислота-цитрат-декстроза).
Во избежание ятрогенной анемизации пациентов объем забираемой для исследований крови должен быть рационально рассчитан, исходя из того, что в конечном итоге непосредственно для анализа расходуется лишь половина от первоначально взятого объема (с учетом использования сыворотки или плазмы при гематокрите 0,5).
При использовании современных анализаторов достаточны следующие объемы образцов:
- для биохимических исследований: 4-5 мл; при использовании гепаринизированной плазмы: 3-4 мл;
- для гематологических исследований: 2-3 мл крови с ЭДТА;
- для исследований свертывающей системы: 2-3 мл цитратной крови;
- для иммуноисследований, включая исследования белков и др.: 1 мл цельной крови для 3-4 иммуноанализов;
- для исследования скорости оседания эритроцитов: 2-3 мл цитратной крови;
- для исследования газов крови: капиллярная кровь - 50 мкл (микролитров); артериальная или венозная кровь с гепарином - 1 мл.
Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (4-5 мл) при соотношении диаметра и высоты пробирки 13 на 75 мм. Использование плазмы вместо сыворотки дает увеличение на 15%-20% выхода анализируемого материала при одном и том же объеме взятой у пациента крови. Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута.
Для обозначения содержимого пробирок с различными добавочными компонентами применяют цветное кодирование закрывающих их пробок. Так, для пробирок с антикоагулянтами лиловый цвет пробки означает наличие ЭДТА, зеленый цвет - гепарина, голубой - цитрата. Добавление в пробирку ингибиторов гликолиза (фторида, йодацетата) как одних, так и в комбинации с антикоагулянтами (гепарином, ЭДТА), кодируется пробкой серого цвета (см. таблицу 1).
3. Прием анализов кала на антиген лямблий - собирать кал в пластиковую банку.
(на дисбактериоз, на кишечную группу бактерий) – собирать кал в специальную стерильную банку.
Желательно сдавать кровь строго натощак.
Кровь на иммунограмму, биохимию, общий анализ можно сдавать через 2-3 часа после еды,
кровь на ИФА можно сдавать после легкой еды.
Кабинет 120.
Общий анализ мочи, анализ мочи по Нечипоренко
Моча собирается в чистую сухую посуду после тщательного туалета наружных половых органов. Для общего анализа мочи лучше использовать первую утреннюю порцию мочи, выделенную после сна, в количестве 100 мл. Для анализа мочи по Нечипоренко – среднюю порцию утренней мочи в количестве 10 мл.
Прием анализа: пн.-пт. 8:00-12:00; 13:00-16:00; в кабинете 123
Соскоб на энтеробиоз
Необходимо заранее взять в лаборатории (кабинет 123) предметное стекло с наклеенной липкой лентой, внимательно выслушать инструкции лаборанта по забору анализа, дома (следуя инструкции) наклеить липкую ленту на перианальную область, снять, наклеить на предметное стекло, не порвав ее.
Прием анализа: пн.-пт. 8:00-12:00; 13:00-16:00, в кабинете 123
Анализ кала на яйца глистов, цисты лямблий, антиген лямблий
Собрать кал в чистую сухую пластиковую или стеклянную банку. Если собран вечерний кал, то до доставки в лабораторию поместить образец в холодильник. Анализ готовится 2 рабочих дня
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 (до 14:00 на антиген лямблий), в кабинете 123
Исследование кала на «скрытую кровь»
Собрать кал в чистую сухую пластиковую или стеклянную банку.
До сдачи анализа исключают из пищи в течение 3-4 дней мясо, рыбу, все виды зеленых овощей, а также помидоры и яйца. Сдают на анализ утренний кал в чистой сухой посуде.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00, в кабинете 123
Бактериологическое исследование кала
(на дисбактериоз, на кишечную группу бактерий)
Желательно собрать утренний кал в специальную стерильную посуду (если невозможно, вечерний кал хранить в холодильнике, доставить в лабораторию к 8.00): положить в специальную стерильную баночку стерильной лопаточкой примерно с половину чайной ложечки, с самой верхней части испражнений, не касаясь других предметов. Баночку закрыть и доставить в лабораторию в течение двух часов.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ на дисбактериоз готовится 5 рабочих дней.
Бактериологическое исследование мочи
Моча собирается в специальную стерильную посуду после тщательного туалета наружных половых органов. При циститах берут первую порцию мочи в количестве 3-5 мл, при заболеваниях почек – среднюю порцию мочи в том же количестве. Доставить в лабораторию не позднее 2 часов после забора.
Прием анализа: пн.-пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 4 рабочих дня
Бактериологическое исследование мокроты
Утреннюю мокроту, выделившуюся во время приступа кашля, собирают в стерильную баночку. Перед откашливанием пациент чистит зубы и полощет рот кипяченой водой с целью механического удаления остатков пищи, слущенного эпителия и микрофлоры ротовой полости. Забранная мокрота доставляется в лабораторию не позднее 1,5-2 часов после забора.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123.
Анализ готовится 4 рабочих дня.
Бактериологическое исследование грудного молока
Для сбора молока на анализ:
1. Тщательно вымыть руки с мылом;
2. Тщательно вымыть грудь с мылом и обтереть чистым проглаженным полотенцем;
3. Руки и соски молочных желез протереть тампоном, смоченным 40% спиртом или водкой;
4. Осторожно открыть стерильную банку, крышку положить наружной стороной;
5. Первые капли грудного молока сцедить в полотенце, последующие – в стерильную баночку;
6. Плотно закрыть крышку, упаковать в пакет и доставить в лабораторию не позднее 1,5-2 часов после забора.
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 3-4 рабочих дня.
Подготовка к сдаче мазка из зева
Мазок из зева забирается до утреннего туалета полости рта (до чистки зубов и полоскания ротовой полости) и натощак или через 2 часа после еды
Прием анализа: пн.–пт. с 8:00-12:00; с 13:00-16:00 в кабинете 123
Анализ готовится 4-6 рабочих дня.
ПОДГОТОВКА К ДУОДЕНАЛЬНОМУ ЗОНДИРОВАНИЮ
3а 2-3 дня до исследования исключить из пищи картофель, бобовые, цельное молоко, черный хлеб, жареные блюда.
На дуоденальное зондирование необходимо подходить к 8.00 в кабинет 125
натощак (не есть, не пить, не курить).
С собой иметь полотенце.
Слепое зондирование (тюбажи по Демьянову)
Утром натощак выпить 1 стакан минеральной воды комнатной температуры без газа, затем лечь на правый бок, приложить к области печени теплую грелку. Лежать 40-60 мин.
МЕТОДЫ СБОРА МАТЕРИАЛА ДЛЯ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЙ:
Осуществлять взятие клинического материала, строго следуя инструкции, только стерильными одноразовыми инструментами в стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры. Работать в одноразовых перчатках.
КРОВЬ ДЛЯ ПЦР
Условия хранения:
при температуре 20-25˚С – в течение 6 часов с момента взятия;
при температуре 2-8˚С – не более 1 суток.
Недопустимо замораживание образцов цельной крови!
МОЧА ДЛЯ ПЦР
Следует забирать первую порцию утренней мочи в количестве 20-30 мл в специальный сухой стерильный контейнер на 60 мл.
Условия хранения:
при комнатной температуре – в течение 6 часов;
при температуре 2-8˚С – в течение 1 суток.
Допускается однократное замораживание-оттаивание материала
МАЗКИ ИЗ РОТОГЛОТКИ ДЛЯ ПЦР
Мазки берут сухими стерильными ватными тампонами на пластиковой основе вращательными движениями с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки ротоглотки. После взятия материала тампон помещают в стерильную одноразовую пробирку со специальной транспортной средой и аккуратно обламывают пластиковый стержень на расстоянии не более 0,5 см от рабочей части, оставляя рабочую часть зонда с материалом в транспортной среде. Пробирку плотно закрывают крышкой.
Условия хранения и перевозки материала:
при комнатной температуре – в течение 6 ч.;
при температуре от 2 до 8˚С – в течение 3 суток;
при температуре минус 20˚С – в течение 1 месяца;
при температуре минус 70˚С – длительно.
Допускается только однократное замораживание-оттаивание материала.
ФЕКАЛИИ ДЛЯ ПЦР
Фекалии следует забирать из предварительно продезинфицированного горшка или подкладного судна. Небольшое количество забирать из нескольких мест одноразовой лопаточкой прикрепленной к крышке стерильного контейнера, в который забирают материал.
Условия хранения:
при комнатной температуре – в течение 6 часов;
при температуре 2-8˚С – в течение 3 суток;
при необходимости хранения более 3 суток – при температуре не выше -16˚С.
Комплексное выявление возбудителей острых кишечных инфекций в одном образце фекалий: одновременное выявление и дифференциация ДНК (РНК) микроорганизмов рода Шигелла (Shigella spp.) и энтероинвазивных E. coli (EIEC), Сальмонелла (Salmonella spp.) и термофильных Кампилобактерий (Campylobacter spp.), аденовирусов группы F (Adenovirus F) и ротавирусов группы А (Rotavirus A), норовирусов 2 генотипа (Norovirus 2 генотип) и астровирусов (Astrovirus))
Материал для исследования – фекалии
Забор: в специальный стерильный контейнер,
собрать кал из продезинфицированного судна одноразовой лопаточкой на крышке контейнера, доставить в течение 6 ч
Ожидание результата 7-10 дней
СОСКОБЫ (МАЗКИ) СЛИЗИСТЫХ ОБОЛОЧЕК УРОГЕНИТАЛЬНОГО ТРАКТА ДЛЯ ПЦР
Забор материала осуществляют с помощью специальных стерильных одноразовых инструментов – урогенитальных зондов, цитощеток.
1. Для получения соскоба эпителия из цервикального канала удалить слизь с поверхности шейки матки стерильным тампоном, ввести рабочую часть цитощетки в цервикальный канал и сделать два полных оборота по часовой и против часовой стрелки. Извлечь зонд, избегая касания стенок влагалища, и поместить его в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть цитощетки обломить в области насечки и оставить в пробирке.
2. Для получения вагинального отделяемого провести по поверхности эпителия заднее-нижнего свода влагалища, вращая зонд и перенести зонд в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть зонда обломить в области насечки и оставить в пробирке. Пробирку плотно закрыть крышкой.
3. Перед взятием соскоба из уретры необходимо обработать наружное отверстие уретры тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Ввести рабочую часть зонда в уретру, несколькими вращательными движениями собрать отделяемое и перенести зонд в пробирку с транспортной средой. Рабочую часть зонда обломить и оставить в пробирке.
Для скринингового исследования материал из разных локализаций можно помещать в одну пробирку с транспортной средой. Для диагностики воспалительных заболеваний материал с каждой локализации следует забирать в отдельную пробирку.
Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:
Кровь для исследования забирается строго натощак, до приема/введения лекарственных препаратов и до обследования (рентгеновское, эндоскопическое, ультразвуковое).
Не рекомендуется кушать 8 часов перед исследованием (не более 14 часов голода), воду разрешается пить в обычном режиме.
Накануне избегать пищевых перегрузок.
Рекомендуется заранее отменить препараты, существенно влияющие на результаты исследования (исключение — случаи контроля за лечением конкретным препаратом).
Кровь для исследования на вещества, концентрация которых в крови изменяется циклически, должна забираться в строгом соответствии с физиологическими циклами. Например, концентрация ФСГ и ЛГ определяется на 5−7 день менструального цикла.
Исключить прием алкогольных напитков накануне исследования.
Не курить в течение 1 часа до исследования.
Накануне исследования исключить физические и эмоциональные перегрузки.
Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:
Накануне сдачи анализа не рекомендуется употреблять овощи и фрукты, продукты с красителями, которые могут изменить цвет мочи.
Не принимать мочегонные препараты перед исследованием.
Очень важна личная гигиена.
Женщинам во время менструации не рекомендуется сдавать анализ мочи.
Правильно соберите утреннюю мочу в контейнер. Для этого при первом мочеиспускании небольшое количество мочи (первые 1 — 2 сек) выпустите в унитаз, а затем, не прерывая мочеиспускания, в контейнер для сбора мочи необходимо собрать около 50−100 мл мочи.
Мочу доставить в лабораторию в течение 1−2 часов.
Для анализа мочи по методу Нечипоренко необходимо собрать утреннюю «среднюю» порцию (в середине мочеиспускания) в объеме 15−25 мл.
Перед сбором мочи необходимо провести гигиенический туалет наружных половых органов.
Правильно соберите мочу:
Первую утреннюю порцию мочи собирать не нужно, но отметьте время мочеиспускания. Затем соберите всю мочу, выделяемую в течение 24 часов от отмеченного времени первого мочеиспускания.
Удобнее сбор суточной мочи проводить в специализированный градуированный пластиковый контейнер объемом 2,7 л.
Мочиться нужно непосредственно в контейнер, после каждого мочеиспускания плотно завинчивая крышку. Во время сбора емкость с мочой следует хранить в холодильнике, не допуская замораживания.
Последнее мочеиспускание производится через сутки в то же время, которое отмечено, как время первого мочеиспускания. Суточный объем мочи в закрытом контейнере необходимо взболтать и отлить порцию (100 мл) в малый контейнер для исследования. Всю мочу приносить не надо!
В больнице необходимо сообщить суточное количество мочи.
Для повышения точности исследования необходимо соблюдать рекомендации:
Не принимать мочегонные препараты во время проведения пробы (24 часа).
Приём всех лекарств в день проведения пробы нужно согласовать с врачом.
В день проведения пробы объём потребляемой жидкости должен составлять 1,5 — 2 литра.
Правильно соберите мочу:
Собирается моча за сутки (всего 8 порций в 8 контейнеров, каждые 3 часа).
! Обратите внимание, первая утренняя порция мочи не собирается. Последующие порции мочи (50 мл) в течение суток собираются в разные пронумерованные контейнеры каждые 3 часа. На каждом контейнере указывается время сбора.
Если в положенное для сбора мочи время ее нет (нет позыва к мочеиспусканию, пропустили ночной сбор мочи), то пронумерованная банка, соответствующая пропущенному времени, остаётся пустой.
В случае внеочередного, частого или обильного мочеиспускания потребуются дополнительные банки, в которые нужно собрать мочу и указать на этикетке время её сбора.
Необходимо записывать объём всей потребляемой жидкости (напитки, жидкие первые блюда и т. п. ) в день проведения пробы.
В лабораторию доставляются все банки с мочой и сведения об объёме выпитой за данные сутки жидкости.
Для анализа мочи на сахар особой подготовки не требуется. Необходимо принести утреннюю порцию мочи.
Требования к сдаче биоматериала:
Перед исследованием кала не рекомендуется проводить рентгенологические исследования желудка и кишечника, колоноскопию, ставить клизмы (в течение 2- х дней перед анализом).
Накануне исследования не следует принимать слабительные, активированный уголь, препараты железа, меди, висмута.
Не использовать ректальные свечи на жировой основе.
Важна личная гигиена наружных половых органов и области заднего прохода.
Не следует допускать попадания в биоматериал мочи или воды.
Не рекомендуется проводить исследование кала у женщин во время менструации.
Собирать кал для исследования следует утром. Если возникают затруднения со сбором кала, то можно подготовить его заранее (не более чем за 8 часов перед сдачей кала в лабораторию). В таком случае пробу следует хранить в холодильнике, не замораживая.
Предварительно помочившись, кал собирают в сухую, чистую емкость. 3−5 см³ кала следует перенести в заранее подготовленный контейнер.
Для сдачи анализа на скрытую кровь специальной подготовки не требуется.
Необходимо перенести пробу кала объемом 3−5 см³ в заранее подготовленный чистый сухой контейнер.
- Рекомендации женщинам по подготовке к сдаче мазка на ПЦР, РИФ, посева на флору, микоплазму, трихомонаду, грибковую инфекцию
Перед исследованием следует учесть рекомендации специалистов:
Не рекомендуется проводить исследование:
— в период приема антибактериальных препаратов
— в период менструации и в течение 1−2 дней после её окончания
— после проведения кольпоскопических проб
За 2−3 дня до исследования следует прекратить использование любых влагалищных таблеток, свеч.
Накануне не следует спринцеваться.
В контейнер собирают утреннюю порцию мокроты (перед завтраком).
Для качественного анализа требуется 3−5 мл исследуемого материала. Если откашливается скудное количество мокроты, то можно сделать раздражающие ингаляции (добавить в воду немного соды и соли) или накануне исследования следует принять отхаркивающие средства.
СПЕЦИАЛИСТЫ
Кузнецова Юлия Маратовна
заведующая клинико-диагностической лабораторией, врач клинической лабораторной диагностики высшей квалификационной категории
Читайте также: